8DEAE-纤维素离子交换层析纯化血清白蛋白.pptVIP

综合实验（一）　血清蛋白质的纯化与鉴定 蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化是对蛋白质进行研究的一项必需的和基础的工作。目前常使用的分离纯化的方法或技术都是在了解蛋白质性质和结构特点的基础上建立的。 目标蛋白质的分离纯化程序主要包括 ⑴材料的选择； ⑵组织匀浆和破碎细胞获取粗提取液； ⑶蛋白质初步提纯； ⑷选择一种或几种合适的方法除去杂蛋白,直至完全纯化； ⑸目标蛋白的鉴定。 用于研究目的蛋白质通常应保持它的生物活性 较低温度下(0－4℃)操作，注意使用蛋白酶(使蛋白质降解的酶)的抑制剂，避免使用剧烈条件，以免蛋白质特定的折叠结构受到破坏。 实验目的 分离血清得到高纯度的白蛋白 对纯化得到的白蛋白进行电泳鉴定 实验内容 第一部分： （本周） 采用DEAE-纤维素离子交换层析纯化血清白蛋白 第二部分： （下周） 采用醋酸纤维素薄膜电泳鉴定纯化得到的白蛋白 第一部分 DEAE-纤维素离子交换层析（Ion Exchange Chromatography, IEC）纯化血清白蛋白 本次实验目的 1、分离血清得到高纯度的白蛋白 2、掌握DEAE-纤维素离子交换层析原理与实验操作技术 3、了解紫外检测仪、自动部分收集器、记录仪、恒压高位槽的原理与使用方法 离子交换层析（Ion Exchange Chromatography, IEC）的基本原理