动物细胞融合与单克隆抗体探究教案--人教版.docVIP

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 （一）引入新课 ［导语］在动物细胞培养的基础上，我们来学习动物细胞融合与单克隆抗体。 ［出示课标］ 知识目标： ⑴ 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。 ⑵ 简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。 ⑶ 了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。 能力目标： 运用动物细胞培养、动物细胞融合技术和筛选方法，尝试设计单克隆抗体的制备过程。 情感、态度与价值观目标： 关注动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，体验科学、技术、社会三者之间的关系。明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。 （二）展示新课 1.动物细胞融合 师：我们在学习细胞膜的流动性时，曾例举过人、鼠细胞融合的例子，（出示幻灯片或板图。）这也是动物细胞融合的一个实例。 据此可以说出动物细胞融合的概念。 概念：动物细胞融合，也称动物细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 过程：在动物细胞融合的过程中，我们又学习到了一种新的诱导方法：灭活的病毒。为什么病毒能使细胞融合呢？ 生：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 师：在人、鼠细胞融合的实验中，培养液中的细胞有几种？如何筛选出杂交细胞？ 已知细胞有丝分裂时要进行DNA的复制和有关蛋白质的合成，已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖，只能在培养液中存活5-7天。鼠骨髓瘤细胞中只有D合成途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，试管中有5种细胞。在培养液中加入氨基喋呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交细胞中可利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。经过一段时间后，培养液中只剩下杂交廇细胞。 师：与植物体细胞杂交技术比较，动物细胞融合有什么特别之处呢？ 植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别（学生填下表） 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 融合前处理 先除去细胞壁 先使细胞分散开 诱导方法 电激、振动、离心、聚乙二醇（PEG） 电激、灭活的病毒、聚乙二醇（PEG） 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体 相同点 原生质体融合原理相同；原生质体融合的方法相似。突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离。 师生共同完成表格。强调原理与诱导方法。 [过渡]利用细胞融合技术为制造单克隆抗体开辟了新途径。 2．单克隆抗体 2.1单克隆抗体制备的概念 师：要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群（单克隆细胞）。这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体。这就是单克隆抗体的概念。（出示幻灯片）。 遗憾的是，在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，能否利用刚学过的方法解决这一难题呢?大家讨论一下，谈谈各自的设想。 2.1单克隆抗体制备的原理 填写课件内容：（单克隆抗体的原理） ◆每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体的功能。 ◆ 骨髓瘤细胞具有无限增殖的特性。 ◆ 利用动物细胞融合技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。 ◆ 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。 2.3单克隆抗体制备的过程 幻灯片提示问题，板图提示步骤。根据单克隆的原理，请同学们参照以下问题分组讨论，尝试设计出单克隆抗体的制备过程。 1.免疫处理后，在小鼠的什么部位取得B淋巴细胞？ 2.把B淋巴细胞与骨髓瘤细胞放在一起，有几种融合方式？ 3.如何筛选出杂交瘤细胞?如何选出分泌所需抗体的细胞？ 4.培养杂交瘤细胞有几种方式? 5.在两种培养方式中如何提取单克隆抗体？ 学生展示探究结果：可以一次性介绍完毕，也可以在教师的提示下进行。 第一步：如何取得B淋巴细胞？ 生：用羊的红细胞对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，从产生免疫反应的小鼠的脾细胞中，他们得到了抗羊红细胞的抗体，这说明在小鼠的脾细胞中形成了相应的B淋巴细胞。 师：我们可以从脾脏中分离出B淋巴细胞。-----板书：1.免疫处理。 有了B淋巴细胞，我们再选出与免疫小鼠属于同一品系的骨髓瘤细胞。---板书：亲本细胞的选择。有了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，下一步如何进行呢? 生：设法将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合。 师：非常好，这一步就是今天刚学习的----板书:2.动物细胞融合。