卵巢癌化疗耐药与纺锤体检测点功能完整性的相关性分析-correlation analysis between chemoresistance of ovarian cancer and functional integrity of spindle detection points.docxVIP

独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日第一部分Taxol对卵巢癌细胞A2780细胞作用的浓度依赖性及相关机制探讨中文摘要研究背景与目的紫杉醇是一类疗效确切、应用广泛的化疗药,其作用机制有干扰微管动力学，调控细胞凋亡相关因子与通路，免疫调节和抑制血管生成等多个方面。一般认为稳定微管,抑制胞质微管的解聚,使细胞分裂阻滞在G2/M期是紫杉醇发挥抗癌效应的主要机制。目前有研究发现低浓度紫杉醇可能是通过G0/G1期阻滞而非G2/M期阻滞诱导细胞凋亡。紫杉醇杀伤癌细胞的效应是否因浓度差异而机制有所不同，目前报道不甚一致。本实验就不同浓度紫杉醇杀伤卵巢癌细胞的内在机制进行了初步探讨，揭示紫杉醇浓度依赖性的抑癌机制，为紫杉醇临床应用过程中剂量的选择提供理论依据。方法为了确定紫杉醇作用的有效浓度就特异的抑癌机制，我们探索性的以0.1、10、0.01、50μmol/L紫杉醇作用于人卵巢癌细胞并采用碘化丙啶(PI)单染法通过流式细胞术检测在这几个不同浓度Taxol作用下细胞周期的不同变化情况。然后通过周期特异性药物对细胞进行同步化处理,采用PI单染法检测低浓度(0.01μmol/L)紫杉醇对细胞周期的影响;AnnexinⅤ/PI双染法检测高浓度(50μmol/L)紫杉醇对卵巢癌细胞坏死的影响。结果①Taxol浓度为0.1、1、10μmol/L时,G2/M期细胞比例显著的比0.01μmol/L组(P0.01)和50μmol/L组(P0.01)高。②卵巢癌细胞经药物thymidine同步化处理后在0.01μmol/Ltaxol的作用下,经过一个细胞倍增时间没有出现G0/G1期阻滞。②0.01μmol/L组,1μmol/L组坏死细胞比例明显低于50μmol/L组(P0.01)。结论在0.1～10μmol/L的浓度范围内,紫杉醇可能通过诱导G2/M期阻滞使卵巢癌细胞发生凋亡,浓度为0.01μmol/L时紫杉醇诱导凋亡与G0/G1期或G2/M期阻滞均无关,浓度为50μmol/L时紫杉醇可能主要通过诱导细胞坏死发挥抗癌效应。关键词卵巢癌;紫杉醇;细胞周期;细胞凋亡Concentration-DependentEffectsofTaxoltoOvarianCancerCellsandtheRelatedMechanismsAbstractBackgroundandObjectiveDrugsthatdisruptmicrotubuledynamicsincludesomeofthemostimportantofcancerchemotherapies.Whilethesedrugs,whichincludepaclitaxel(Taxol),areknowntoinvokethemitoticcheckpoint,thefactorsthatdeterminecancercellkillingremainincompletelycharacterized.Cellsthatarerelativelyresistanttokillingbythesedrugsblockrobustlyinmitosis,whereascellssensitivetokillingblockonlytransientlyinmitosisbeforeundergoingnuclearfragmentationanddeath.Passagethroughmitosiswasanabsoluterequirementofdrug-induceddeath,becausedeathwasmarkedlyreducedincellsblockedatbothG1-SandG2.Cellkillingwasatleastinpartlinkedtotheabsenceorinactivationofakinetochoreassociatedphosphoproteinthatmedi