Cedex XS 细胞计数仪操作手册.doc

Cedex XS 细胞计数仪操作手册 一、 启动Cedex XS 系统 1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开； 2. 打开Cedex XS 控制软件： 打开配套电脑，进入Windows操作系统； 双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心； 3. 调节白平衡：首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。 把支架拉出； 点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框； 点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存； 调节完毕后关闭对话框。 二、 细胞计数与活性测定 1. 样品制备 ① 用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml； ② 使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数； ③ 将细胞悬液充分混匀； ④ 用移液枪取细胞悬液加入样品，每10μl；可以一次测定八，也可测定单。 2. 进样：样品有八个，一次可测定四个。 ① 拉出支架； ② 加有样品方向朝里，将样品放上支架； ③ 将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品位置指示灯表示样品测定进程。 三、 软件设置： 1. 打开测定界面：在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面； 2. 设置样品参数： ① 在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，最多可输入21个字符； ② 输入样品编号（Sample ID），最多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号； ③ 软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间； ④ 点击MI×键，出现进样体积对话框； ⑤ 输入样品量（Sample Volume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent Volume）； ⑥ 系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。 3. 设置测定与分析参数： ① 在分析参数栏选择需要的精度水平（Precision）：精度水平表示单次测定样品数，最多8个； ② 选择细胞类型，默认的细胞类型有：标准大小细胞直径约12-14μm；可识别对象；小直径约8μm； ③ 系统自动添加系统名和测定时间。 四、 开始测定 ① 点击START MEASUREMENT键； ② 测定多个样品时，在弹出对话框后将支架推进一格，点击确定自动开始测定程序； ③ 重复上一步骤测定其他样品； ④ 若测定样品多于四个，可将抽出后调转方向重新插入进行上述测定程序； ⑤ 全部测定结束后关闭对话框。 五、 计数结果 1. 在测定界面获得结果 测定程序完成后，结果在测定界面的数据栏（Result Data）显示，数据栏有两个表格：第一个表格显示总细胞数，第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。 两个表中分别列出以下参数： Viable Cell Conc.: 活细胞浓度 [×105/mL] Total Cell Conc.: 总细胞浓度 [×105/mL] Viability (%): 细胞总数中活细胞的 Total Cell Count: 测定总细胞数 Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度（1表示细胞形状均一） Avg Diameter: 测定活细胞平均直径 [μm] Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值 Dead Cell Conc.: 死细胞浓度 [×105/mL] Viable Cell Count: 测定活细胞数 Dead Cell Count: 测定死细胞数 Total Object Count: 全部测定数 Total Object Conc.: 总浓度 [×105/mL] Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径 [μm] Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。 在单个样品结果表中，会有三项列在表头： Image No.: 图像编号 Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求 Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示 2. 在柱形图中看结果：此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果 ① 在测定界面点击HISTOGRAMS键，打开柱形图对话框； ② 可选择以下项目： 成团细胞柱形图 细胞直径柱形图 细胞形状均一度柱形图 总群直径柱形图 六、 查看图像 单副图像：在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像； 多幅图像：在图像显示区点击VI