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紫草油提取工艺研究 　　摘要：目的：优选麻油提取紫草素的最佳提取工艺。方法：以左旋紫草素含量为指标，应用正交实验设计，筛选紫草油的最佳提取工艺。结果：取紫草加6倍麻油量、提取温度60℃、提取时间2h，可制备最佳紫草素。 　　关键词：紫草素；提取工艺；正交试验 　　中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)04-0861-02 　　 　　紫草为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma(Royle)johnst．或内蒙紫草drnebia guttata Bunge．的干燥根。史载于《神农本草经》，味苦、性寒、具有凉血解毒透疹之功效。用于血热毒盛、斑疹、麻疹不透、疮疹湿疹、水火烫伤［1］。紫草中的主要成分为萘醌类色素，主要有乙酰紫草素、紫草素等［3］。紫草素具抗炎［4］、促进肉芽组织生成［5］等药理作用。传统工艺多采用高温油炸或冷浸过夜等方法来制备紫草油。本实验采用正交试验法，以左旋紫草素为指标，对提取油量、提取温度和提取方法3个因素进行考察，以期能优选出麻油提取紫草素的最佳工艺。 　　 　　1仪器与试药 　　 　　1．1仪器 　　TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；双列4孔电热恒温水浴锅(山东医疗器械厂)；KDM型调温电热套(山东省鄄城光明仪器有限公司)；DHE-600型多功能红外快速干燥箱(杭州蓝天化验仪器厂)；普利赛斯XS系列原装天平。 　　 　　1．2试药 　　紫草原药材(济南药业集团有限责任公司中药饮片厂，批；左旋紫草素对照品(中国药品生物制品检定所，1l01769―2004050：麻油（济南药业集团)。 　　 　　2实验方法 　　 　　2．1正交实验设计 　　通过考察，确定紫草的提取油量、提取温度、提取时间3个因素，设计采用3因素3水平，选用L9(34)正交试验进行实验，因素水平见表1。 　　 　　 　　2．2样品中紫草素提取量测定 　　2．2．1样品溶液制备称取紫草药材10g粉碎，加入适量麻油浸渍24h，按L9(34)正交表安排提取滤过，收集合并麻油提取液至100mL容量瓶中，加麻油至刻度，得供试品溶液A1～A9，待测。 　　2．2.2标准曲线的绘制精密称取左旋紫草素标准品4．7mg置25mL容量瓶中，加麻油溶解并稀释至刻度，得浓??约为0．188mg／mL的左旋紫草素对照品溶液，作为标准品储备液(Ⅰ)。再分别精密吸取Ⅰ液0．4、0．8、1．2、1．6、2．0mL，分别加麻油定容于10mL容量瓶中，按分光光度法，以麻油作空白对照，在516nm处测定吸收度。用最小二乘法，以吸收度值(A)为纵坐标，以对照品浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：A=0．0215C+0．0435 r=0．9990，说明左旋紫草素浓度在7．52～45．12μg／mL的范围内有良好的线性关系。 　　2．2．3精密度实验精密量取样品A8 0．5mL置10mL容量瓶中，用麻油稀释至刻度，再精密吸取稀释液2．0mL加麻油定容至10mL。以麻油为空白，在516nm下用紫外分光光度计连续测定6次，RSD为0．625％，表明精密度良好。 　　2．2．4稳定性试验日内稳定性：取样品A8，按照精密度试验项下测定方法，每小时测1次，连续测定6h，RSD为0．470％，表明样品稳定性良好。 　　2．2．5加样回收率试验精密量取样品A8 2．0mL 5份，分别加入标准品储备液(Ⅰ)0．4、0.4、0．4、0．6和0．6mL：得供试品溶液B1～B5。以麻油作空白，在516nm波长下测定吸收度，测得平均回收率为101．2％，RSD为0．6067％。 　　2．2．6供试品含量测取得批次样品，按照精密度项下测定方法操作，得供试品溶液C1～C9。按分光光度法，以麻油作空白，在516nm处测定吸光度，结果见表2。 　　 　　 　　3实验结果 　　 　　紫草素提取量的正交试验结果：从表3可知，极差(R)最大的为A因素，其次分别为C因素B因素，说明在麻油提取紫草素工艺中，对提取量影响最大的因素为提取油量，其次分别为提取时间、提取温度。 　　方差分析结果：从表4可知，A因素3个水平之间有显著性差异(P0．1)。确定最佳提取工艺为A2、B1、C2。即最佳提取油量为6倍量，提取温度为60℃，提取时间为2h。 　　 　　 　　4验证实验 　　 　　取10g粉碎的紫草加6倍量麻油浸渍24h，在最佳提取条件下提取，按照样品含量测定项下方法，在516nm处测定吸收度。重复实验3次，取平均值，结果见表5。 　　 　　 　　5讨论 　　 　　正交设计法对紫草油的提取工艺条件研究表明，影响紫草油提取率