tkgcv系统对骨肉瘤mg-63细胞杀伤的体外实验分析-experimental analysis of tk gcv system killing osteosarcoma mg - 63 cells in vitro.docxVIP

下载本文档

2
0
约3.36万字
约 42页
2018-05-28 发布于上海
举报
版权申诉

tkgcv系统对骨肉瘤mg-63细胞杀伤的体外实验分析-experimental analysis of tk gcv system killing osteosarcoma mg - 63 cells in vitro.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

tkgcv系统对骨肉瘤mg-63细胞杀伤的体外实验分析-experimental analysis of tk gcv system killing osteosarcoma mg - 63 cells in vitro

TK/GCV 系统对骨肉瘤 MG-63 细胞杀伤的体外实验研究摘要目的探讨脂质体介导的 TK/GCV 系统对人骨肉瘤 MG-63 细胞的杀伤作用及其所产生的“旁观者效应”。方法脂质体介导 TK 基因体外转染骨肉瘤 MG-63 细胞，倒置荧光显微镜观察细胞转染是否成功，流式细胞仪检测转染细胞与未转染细胞的转染效率。将未转染的骨肉瘤 MG-63 细胞分为 3 组，实验组 1 用转染 TK/GCV 的细胞上清液按 1/10， 1/7，1/5，1/2 比例与培养液的混和液培养，实验组 2 用经 0.22μm 滤器过滤的转染后细胞上清液按 1/10，1/7，1/5，1/2 比例与培养液的混和液培养，对照组用培养液培养，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法分别测定各组细胞的生长抑制率、骨肉瘤细胞对 TK/GCV 系统的敏感性以及转染细胞的旁观者效应。结果1、经 TK 基因转染的 MG-63 细胞，倒置荧光显微镜下有大量绿色荧光蛋白表达，流式细胞仪检测转染 TK 基因的细胞转染效率可达 75.5％。2、6 天后 MTT 检测结果显示实验组 1 中各比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比均有统计学意义（P0.05），实验组 2 中 1/10 与 1/7 比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比差异无统计学意义（P0.05），这与加入原培养液的浓度有关。经 TK 基因转染的 MG-63 细胞随 GCV 浓度增加，细胞凋亡率增加。结论脂质体介导的 TK/GCV 系统能够通过旁观者效应抑制骨肉瘤 MG-63 细胞的生长。关键词：骨肉瘤基因治疗TK/GCV旁观者效应The experimental research to TK/GCV system for osteosarcoma MG - 63 cell damage in vitro AbstractObjectiveTo investigate the killing effect of GCV combined with suicide gene TK for human osteosarcoma MG-63 cells and produced by the “bystander effect”.MethordsLiposome-mediated TK gene transfect into MG-63 OS cells, the efficiency of infection was analyzed by flow cytometry and observed under inverted fluorescence microscope. Non-transfected osteosarcoma MG-63 cells were divided into three groups, the experimental group 1 transfected TK / GCV cell supernatant by 1/10, 1/7, 1/5, 1/2 ratio and training solutiona liquid mixture of culture, the experimental group 2 was filtered through 0.22μm filter and after transfection of cell supernatant by 1/10, 1/7, 1/5, 1/2 the ratio of the liquid mixture of the culture solution cultured in control group cultured fluid cultures, MTT assay were measured in each group cell growth inhibition rate and osteosarcoma cell sensitivity to TK / GCV system.ResultsThe TK gene was transfected into MG-63 OS cells successfully by liposome-mediated ，Flow cytometry instrument detection TK gene transfection cell transfection efficiency can reach 75.5%.Six days later the MTT assay showed that the experimental group 1 ratio of the concentration of the mixed