(实验诊断学)骨髓细胞学检查讲解材料.pptVIP

上海交通大学医学院 三．碱性磷酸酶（NAP） 中性粒细胞碱性磷酸酶是中性粒细胞中的特异性颗粒（S颗 粒）所释放的一种酶，存在于细胞浆内的三级颗粒中呈不规则 形的管状结构，该酶的活力与积分受到体内许多因素的影响。 如中性粒细胞的成熟度、HbF、内分泌功能等均可使NAP的积 分产生一定的差异，但正常人群中性粒细胞的阳性程度一般很 少到三分，绝对达不到四分。若结合染色体检查可协助慢粒的 诊断。 上海交通大学医学院 原理 pH9.6 α-磷酸萘酚 + H2O α-萘酚 + 磷酸 碱性磷酸酶 + 重氮盐 有色沉淀物 方法 根据各公司产品说明书进行 正常阳性细胞 在血细胞中除成熟中性粒细胞阳性外， 其他细胞基本呈阴性。 上海交通大学医学院 临床评价 1.生理变化： 年龄、应激、妊娠可见增高或降低 2.病理变化： （1）．增高 感染、AA、类白血病、急淋、其它 （2）．减低 粒缺、脾亢、感染（G－）、病毒、白血病 上海交通大学医学院 五．氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 （ A S – D C E ） 此酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中。通常从原粒细胞后 期即可见有弱阳性反应，而到早幼粒细胞就可见强阳性反应。 且酶的活性不随细胞分化成熟而增强。此酶的阳性产物比 POX更为特异。 单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞等均为阴性，所以在临床 上将AS-DCE染色作为是粒细胞的标志性酶。 上海交通大学医学院 原理 氯化醋酸AS-D萘酚酯酶 氯化醋酸AS-D萘酚 AS-D萘酚 + 醋酸 + 重氮盐 有色沉淀物 方法 根据各公司产品说明书进行 阳性细胞 中性粒细胞阳性外，其他血液细胞均为阴性。 临床评价 粒细胞及肥大细胞的标志酶 上海交通大学医学院 非特异性酯酶是属水解酶,通常可分为中性酯酶(NAE)、酸性酯酶（ANAE）和丁酸酯酶（NBE）。由较多的同工酶所组成，在不同的细胞内存在有不同的同工酶。电泳分析证明人血细胞含有九种酯酶同工酶，如中性粒细胞含同工酶1、2、7、9；单核细胞和血小板含有同工酶4、5。淋巴细胞含有同工酶1和6等。其中同工酶4、5 能被NaF所抑制，所以对染色呈阳性的细胞作NaF抑制试验可鉴别中性粒细胞和单核细胞。 非特异性酯酶检测通常应用于白血病的鉴别诊断，而白血病细胞的高度异型性或异质性使酶活性的表达出现紊乱，所以组合酯酶检测比单一检测更具价值和意义。 四．非特异性酯酶 上海交通大学医学院 临床上非特异性酯酶一般选用： α-醋酸萘酚酯酶（α- NAE） α-丁酸萘酚酯酶（α– NBE） 醋酸AS-D萘酚酯酶（ AS-DAE ） 若将上述任何一个酶与POX或AS-DCE染色于同一张标 本片上，就被称为双酶（双酯）染色。可使粒细胞系和 单核细胞系分辨得更清楚。 上海交通大学医学院 原理（α-NAE、AS-DAE、α-NBE） α-醋酸萘酚 α-萘酚 + 醋酸 α-醋酸萘酚酯酶 + 重氮盐 有色沉淀物 方法 根据各公司产品说明书进行 临床评价 此组合酶类染色，主要运用于各种急性白血病的鉴别诊断，特别在急 非淋（ANLL）中的分型和亚型分型提供重要依据。 上海交通大学医学院 六．铁染色 骨髓铁包括细胞内铁和细胞外铁。细胞内铁为幼红细胞 合成血红蛋白时的利用形式，而细胞外铁是骨髓以含铁血 黄素形式存在的储存铁。骨髓铁染色可了解骨髓中幼红细 胞对铁利用的功能和铁原料在机体内的吸受与储存情况， 若将铁染色与血清、总铁结合力等检测综合观察，可了解 机体内铁的动态变化。所以铁染色是诊断缺铁性贫血最重 要且较早期的指标之一。 上海交通大学医学院 细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾反应形成蓝色的亚铁 氰化铁，定位于含铁的部位。 正常值：细胞外铁--（+）--（++）