生化第三章课件.pptVIP

DNA结构的多样性 B-DNA 右手双螺旋结构 生理盐水92%湿度 Z-DNA 左手双螺旋结构　 人工合成晶体结构 A-DNA 右手双螺旋结构 相对湿度75%以下 B-DNA Z-DNA A-DNA 二、DNA的超级（超螺旋）结构 超螺旋结构 DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。 正超螺旋 盘绕方向与DNA双螺旋方向相同 负超螺旋 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反 如：原核生物DNA的超级结构 附：DNA在真核生物细胞核内的组装 真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体。 核小体的组成 DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A H2B H3 H4 三、DNA的功能 DNA的基本功能是生物遗传信息的携带者，并作为基因复制和转录的模板。通过DNA的碱基序列决定蛋白质的氨基酸顺序。 DNA是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。 基因从结构上定义，是指DNA分子中的特定区段。其中的核苷酸排列顺序决定了基因的功能。 第三节 RNA的结构与功能 RNA的种类、分布、功能 * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构，称为多聚A尾。 一 、信使RNA（mRNA） 帽子结构 3.mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，再依照自身的碱基顺序指导蛋白质合成过程中的氨基酸排列顺序。 DNA mRNA 蛋白 转录 翻译 原核细胞 细胞质 细胞核 DNA 内含子 外显子 转录 转录后剪接 转运 mRNA hnRNA 翻译 蛋白 真核细胞 tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基，如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C 二、转运RNA（tRNA） N,N二甲基鸟嘌呤 N6-异戊烯腺嘌呤 双氢尿嘧啶 4-巯尿嘧啶 稀有碱基 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环 氨基酸臂 额外环 tRNA的三级结构 —— 倒L形 tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 细胞内含量最多的RNA。 三、核蛋白体RNA（rRNA） rRNA的功能 参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 核 酸 的 理 化 性 质 第 四 节 一、核酸的一般性质 DNA是生物大分子，两性电解质。人的染色体DNA约为3×109碱基对。DNA溶液属于高分子溶液，具有很高的粘度和较强的酸性。 二、核酸的紫外吸收 由于核酸的组成成分嘌呤碱及嘧啶碱具有强烈的紫外吸收性质，所以核酸有紫外吸收，最大吸收值在260nm（OD260）（A260）处。 利用紫外吸收特性，可对核酸进行定量、定性分析。 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 OD260的应用 三、DNA的变性与复性 变性定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 方法：过酸，过碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后其它理化性质变化： （A260）OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 例：变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液（A260）OD260增高的现象。 Tm：紫外光吸收值（A260）达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 热变性 四、DNA的复性与分子杂交 DNA复性的定义 当变性条件缓慢解除后，变性DNA的两条互补链可重新配对，恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火 。 * * * 第 三 章核酸的结构