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三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation) 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 退火(annealing) * 82 第49页/共49页 * * * 一、DNA的分子结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 5′端 3′端 C G A （一）DNA的一级结构 * 82 第17页/共49页 5′端 3′端 核苷酸的连接 核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链，即核酸。 C G A * 82 第18页/共49页 * 82 第19页/共49页 A G P 5? P T P G P C P T P OH 3? 书写方法 5? pApCpTpGpCpT-OH 3? 5? A C T G C T 3? 目 录 * 82 第20页/共49页 （二）DNA的二级结构 ——双螺旋结构 * 82 第21页/共49页 * 82 1953年 J.D.Watson F.C.Crick 将DNA的功能 与结构特征联 系起来 。 第22页/共49页 1.DNA双螺旋结构的研究背景 碱基组成分析 Chargaff 规则：[A] = [T] [G] ? [C] 碱基的理化数据分析 A-T、G-C以氢键配对较合理 DNA纤维的X-线衍射图谱分析 目 录 * 82 第23页/共49页 碱基互补配对 T A G C A=T G≡C * 82 第24页/共49页 1、右双螺旋，反向平行 2、碱基在内，主链在外 3、碱基互补，A＝T，G≡C 4、螺旋一圈，十对碱基 5、结构稳定，副键维系 6、大沟小沟，调节关键 * 82 2. DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） 第25页/共49页 * 82 氢键:双链横向稳定 碱基堆积力:纵向稳定 磷酸基与介质之间:离子键 　 第26页/共49页 （三）染色质与染色体 真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体(nucleosome)。 核小体的组成 DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4 * 82 第27页/共49页 * 82 第28页/共49页 * 82 30nm 染色质纤维是以 4 个核小体为结构单元，各单元之间通过相互扭转形成一个左手双螺旋高级结构，该研究也首次明确了连接组蛋白 H1 在 30nm 染色质纤维形成过程中的重要作用。 Science, 25 April 2014 第29页/共49页 （一）RNA的种类、分布、功能 二、RNA的种类和分子结构 * 82 第30页/共49页 （二） RNA的结构特征 AMP、GMP、CMP及UMP 含有稀有碱基。 3’，5’磷酸二酯键 单链结构，局部双链螺旋(发夹结构) A＝U，G≡C。 易被碱水解 * 82 第31页/共49页 （三）参与蛋白质生物合成的三类RNA的结构 * tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基，如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 1.转运RNA的结构与功能 * 82 第32页/共49页 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环 氨基酸臂 额外环 * 82 第33页/共49页 * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 * 82 第34页/共49页 2.信使RNA的结构与功能 hnRNA 内含子 (intron) mRNA * mRNA成熟过程 外显子 (exon) 目 录 * 82 第35页/共49页 * mRNA结构特点 真核mRNA 5′末端: 帽子结构：m7GpppNm 2. 真核mRNA的3′末端: polyA, 多聚A尾。 * 82 第36页/共49页 帽子结构 * 82 第37页/共49页 帽子结构: 保护mRNA免受核酸酶从5’端的降解作用 在翻译起始中具有促进核糖体与mRNA的结合、加速翻译起始速度的作用 多聚A尾: 增加mRNA的稳定性 维持其翻译活性 帽子结构和多聚A尾的功能 * 82 第38页/共49页 * mRNA的功能 ? 第39页/共49页 * rRNA的结构 3.核蛋白体RNA的结构与功能 * rRNA的功能 参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 * 82 第40页/共49页 核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第 三 节 目 录 * 82 第41页/共49页