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* * * * * * 酶的生物合成 张 杰 初双双 袁 贝 一、酶的生物合成基本理论 二、调控机制 三、应用 四、举例 酶生物合成的基本理论 （一）RNA的生物合成 — 转录 （二）蛋白质的生物合成 — 翻译 （三）酶生物合成的调节 1、操纵子学说 2、分解代谢物阻遏作用 3、诱导作用——乳糖操纵子 4、反阻遏作用——Trp操纵子 遗传信息传递的中心法则  蛋白质 翻译 转录 逆转录 复制 复制 DNA RNA （一）RNA的生物合成--转录(transcription) 定义 以DNA为模板，以核苷三磷酸为底物，在RNA聚合酶（转录酶）的作用下，生成RNA分子的过程。 过程 起始 延长 终止 定义 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和辅助因子的作用，合成多肽链的过程。 （二）蛋白质的生物合成--翻译(translation) （三）蛋白质的合成过程 （大肠杆菌） 氨基酸的活化 肽链合成的起始 肽链的延伸 肽链合成的终止与释放 （四）在核糖体上合成多肽（三阶段） 1、起始阶段 2、延伸阶段 3、终止阶段 二、酶生物合成的调节 定义：通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制，是在基因转录水平上进行的。 意义：通过阻止酶的过量合成，节约生物合成的原料和能量。 操纵子——基因表达的协同单位 操纵子 结构基因（编码蛋白质, structural gene,S） 控制部位 操纵基因（operator gene, O） 启动子（promotor gene, P） （一）基因调控理论  Jacob and Monod的操纵子学说（operon theory） (二) 酶合成调节的类型 1.诱导 (induction) 组成酶：细胞固有的酶类。 诱导酶：是细胞为适应外来底物或其结构类似 物而临时合成的一类酶。 2.阻遏 (repression) 分解代谢物阻遏(catabolite repression) 反馈阻遏(feedback repression) 酶合成的调节机制 1. 酶合成的诱导 加进某种物质，使酶生物合成开始或加速进行。 2.末端产物阻遏 由某代谢途径末端产物的过量累积引起的阻遏。  3.分解代谢物阻遏 指细胞内同时有两种分解底物（碳源或氮源）存在时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶合成的现象。 分解代谢物的阻遏作用，并非由于快速利用的甲碳源本身直接作用的结果，而是通过甲碳源（或氮源等）在其分解过程中所产生的中间代谢物所引起的阻遏作用。 提取分离法 微生物细胞发酵产酶 酶的生产方法 生物合成法 植物细胞培养产酶 化学合成法 动物细胞培养产酶 三、应用 常见产酶微生物 Common 基本要求： 不是致病菌 发酵周期短,产酶量高 不易变异退化 最好是产生胞外酶的菌种,利于分离。 对医药和食品用酶,还应考虑安全性： 凡从可食部分或食品加工中传统使用的微生物生产的酶,安全! 由非致病微生物制取的酶,需作短期毒性实验。 非常见微生物制取的酶,需做广泛的毒性实验,包括慢性中毒实验。 举例： ①枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) ②大肠杆菌(Escherichia coli) ③黑曲霉(Aspergillus niger) ④米曲霉(Aspergillus orgzae ) ⑤青霉(Penicillium ) ⑥木霉(TrichodPrma ) ⑦啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 微生物酶的类型 1.胞外酶：大多是水解酶（如淀粉酶、蛋白酶、 纤维素酶、果胶酶），是微生物为了利用环境中的大分子而释放到细胞外的，即使胞外浓度很高，胞内也能维持较低水平，受到的调节控制少。 2.胞内酶：指合成后仍留在细胞内发挥作用的酶，酶活性和浓度受到中间产物和终产物的调控。 动、植物细胞培养产酶 与微生物细胞相比，动物细胞和植物细胞具有各自不同的特性，需采用各自不同的培养工艺。 植物、动物、微生物细胞的特性比较 细胞种类 植物细胞 微生物细胞 动物细胞 细胞大小/um 200～300 1～10 10～100 倍增时间/h ﹥12 0.3-6 ﹥15