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猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用 导读：就爱阅读网友为您分享以下“猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用”资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 生物工程学报 cjb@Chin J Biotech 2008, September 25; 24(9): 1573-1581 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 ? 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved研究报告猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用李祥健 1, 2, 张建武 1, 吕健 1, 余丹丹 1, 姚火春 2, 袁世山 11 中国农业科学院上海兽医研究所 动物传染病防治研究室 农业部动物寄生虫病重点实验室, 上海 200241 2 南京农业大学动物医学院 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室, 南京 210095摘要: 高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行, 目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以 PRRSV 弱毒感染性克隆-pAPRRS 作为主要骨架, 将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4-7)以及 3′UTR 区 域替换入 pAPPRS 相应编码区域, 构建了 pSX12(ORF4-7-3′UTR)、p5NX12(ORF5-7-3′UTR)以及 p56N12(ORF5-6)三个 PRRSV 全长嵌合克隆。 DNA 转染 Marc-145 细胞后拯救出嵌合病毒, 并对拯救病毒进行了病毒生物学特性的分析; 选 经 取拯救病毒 v56N12(ORF5-6)和 vSX12(ORF4-7-3′UTR)免疫 29 日龄猪进行免疫原性试验, 结果表明, 以 v56N12 免疫后 抗体水平相对较低, 故免疫原性相对较差; 而 vSX12 病毒免疫后 14 d 血清 ELISA 抗体达到阳性值(IDEXX ELISA 值 s/p ≥0.4), 免疫后 28 d 中和抗体效价从原来的 1:5 以下上升到 1:15 以上, 说明 vSX12 具有良好的免疫原性并可进行免疫监 测;免疫后 28 d 以强毒 JX143 株攻毒, 结果 vSX12 免疫组未见发病, 而未免疫攻毒对照组全部发病并有 1 头死亡, vSX12 免疫猪攻毒后病毒血症持续 6 d 后消失, 而对照组攻毒后至少持续 13 d, 说明 vSX12 可对高致病性猪蓝耳病提供有效的 免疫保护。本研究构建的三个嵌合病毒为开发同时抗经典和变异株 PRRSV 感染的二价疫苗, 以及探寻高致病性猪蓝耳 病病毒的毒力因子奠定了基础。 关键词: 猪繁殖与呼吸障碍综合征, 高致病性猪蓝耳病, 感染性克隆, 嵌合病毒, 候选疫苗Construction and Application of Chimeric Infectious Clones of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome VirusXiangjian Li1, 2, Jianwu Zhang1, Jian Lü1, Dandan Yu1, Huochun Yao2, and Shishan Yuan11 Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China 2 Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Ministry of Agriculture, Nanjing 210095, ChinaAbstract: In recent years, mass outbreaks of highly pathogenic (HP) porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)have spread all over the Chinese swine industry. Based on the first infectious cDNA clone of HP PRRSV strain pJX143 and th at of an attenuated PRRSV, pAPRRS, co