第一篇 章病毒1 环境微生物课件.ppt

实验要求： 1、 实验前请每位同学认真预习并完成实验预习报告（使用学校统一规定的实验报告），没有预习报告或预习报告不合格不准进入实验室进行实验。 2 、以上实验若遇特殊情况需调整的另行通知。 3、《环境类微生物专业基础实验指导书》，赵远、梁玉婷、孙向武 编;第一章 病毒 一.病毒概述 二.病毒的形态结构 三.病毒的繁殖 四.病毒的培养 五.病毒的抗逆性及其应用;第一节 概述;2、病毒的发现和研究历史;一、病毒的特点和定义;病毒的特点： ?超显微的大分子生物，可通过细菌滤器；缺乏酶类、无核糖体、无蛋白质合成系统； ?无细胞结构，只含一种核酸； ?专性活细胞内寄生，体外可以无生命状态存在且可结晶、可长期保持其侵染性； ?特殊的繁殖方式：复制+装配； ?对干扰素敏感，对抗生素不敏感。 超微小 ;4.病毒的分类: ;二. 病毒的形态、结构;球形???毒：脊髓灰质炎病毒;T4噬（shi）菌体病毒：蝌蚪形病毒;2、病毒的大小;采用各种电镜技术观察毒粒的形态结构;病毒的大小;3. 病毒的化学组成和结构;病毒是一类既具有化学大分子属性，又具有生物体基本特征； 既具有细胞外的感染性颗粒形式，又具有细胞内的繁殖性基因 形式的独特生物类群。;毒粒的壳体结构;螺旋对称壳体： 亚基有规律地沿着中心轴 （核酸）呈螺旋排列，进 而形成高度有序、对称的 稳定结构。;具有双对称结构的典型例子是有尾噬菌体（tailed phage）,其壳体 由头部和尾部组成。包装有病毒核酸的头部通常呈二十面体对称， 尾部呈螺旋对称。;病毒的包膜结构;4、 毒粒的结构类型;二、毒粒的化学组成;◆一种病毒至含有一种核酸（DNA或RNA）。 植物病毒绝大多数含DNA;少数含RNA； 动物病毒一部分含DNA，一部分含RNA； 细菌病毒普遍含DNA，含RNA的极少。 ◆病毒的核酸类型极为多样化： ▼ ▼病毒的DNA与RNA均有单链和双链： dsDNA ssDNA dsRNA ssRNA ;▼病毒DNA分子有线装和环状之分。 ▼病毒核酸有正链（＋）和负链（—）的区分： 规定：将碱基序列与mRNA一致的核酸单链定位正链，将碱基序列与mRNA互补的核酸单链定位负链。因此，就病毒核酸链的单与双以及正和负有以下6 种类型： (±)DNA——大部分DNA病毒 (±)RNA——动物呼肠孤病毒 （＋）DNA ——大肠杆菌?X174噬菌体 （＋）RNA——所有单链RNA病毒\大部分植物病毒 （—）DNA——腺病毒 （—）RNA ——流感病毒 ;2.病毒的蛋白质;?病毒的蛋白质: 起保护作用并决定病毒的抗原性、致病性和毒力等; 衣壳粒蛋白的的不同排列组合，决定病毒的三种对称性构型：立体对成、螺旋对称和复合对称。 ;3.其他成分;三、病毒的复制;病毒的复制：;病毒的复制周期;1、吸附：;1、吸附：;1、吸附：;2、侵入：;2、侵入：;2、侵入：;3、脱壳：;4、病毒大分子的合成;4、病毒大分子的合成;5、病毒的装配与释放;5、病毒的装配与释放;吸附;病毒侵入后的三种结局;动物细胞病毒致病的可能结果;温和噬菌体的溶源性反应：;四、病毒的培养和纯化;四、病毒的培养和纯化;四、病毒的培养和纯化;四、病毒的培养和纯化;四、病毒的培养和纯化; 蛋白质提纯方法 （盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等）;3. 病毒的培养计量单位： 动物病毒的空斑试验：单层细胞的制备与培养、病毒样品的采集、病毒的接种与观察。（见书21－22） ηPFU＝n瓶内空斑平均数× 病毒稀释度/接种量（PFU：plague formation unit, 病毒空斑单位） 系列稀释终点（滴度）：CPE50, TCID50, ID50, LD50 CPE50：median cell pathological effect;半数细胞病理效应剂量：细胞形态半数发生变化的 病毒稀释度 TCID50: median tissue cell infective dose. 半数组织细胞培养感染剂量；能产生培养管中50%的细胞病理效应的最高病毒稀释度（即最少的病毒量） ID50: median infective dose. 半敏感剂量：使50%的敏感动物发生变化的感染剂量。 LD50