培养基设计上.pptxVIP

1 发酵生产的一般流程 菌种 培养基 过滤 下游 提取 扩大 培养 产品 空气 灭菌 2 一、培养基的类型 培养基是指利用人工方法配制的供微生物、植物和动物细胞生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质的混合物。 培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产品的质量和产量、产品的分离精制都有重要的影响。 3 1、按培养基成分 1）合成培养基  所用原料的化学成分明确、稳定 如葡萄糖、硫酸铵  用于实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、 选育菌种、遗传分析定量研究工作；在生产某些疫苗的过程中，为了防止其他蛋白质等杂质掺入，也常用合成培养基；  营养单一、价格较高，不适于大规模生产 2）天然培养基 原料是一些天然动、植物产品 如花生饼粉、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、玉米浆等  来源广泛（大多为农副产品）、营养丰富、价格低廉、适于工业化生产  一般不需要另加微量元素、维生素等物质  由于成分复杂，不易重复，如对原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性 3）半合成培养基 既含天然成分，又含纯化学试剂 发酵工业中使用的培养基绝大多数是半合成培养基 4 2、按物理状态分 1）固体  适于菌种和孢子的培养与保存，传统发酵食品的生产，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、木耳等的生产；  近年来由于机械化程度的提高，在发酵工业上又开始应用固体培养基进行大规模生产，其组分常用麸皮、大米、小米、木屑、禾壳等。 2）半固体  琼脂0.5%-0.8%  主用于鉴定细菌、观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等 3）液体 发酵工业大规模使用的培养基 5 2.发酵培养基的成分及来源 培养基通常都含有微生物生长繁殖所必须得碳源（能源）、氮源、无机盐、生长因子和水等营养成分。有些还含有前体、产物促进剂和抑制剂等。 6 一、碳源 凡是作为微生物细胞结构或者代谢产物中碳架来源的营养物质，都称为碳源。 主要功能： 1）为菌体的生长繁殖提供能源和合成菌体所必需的成分； 2）为合成目的产物提供所需的碳元素成分 一、碳源 7 常用的碳源: 特殊情况下（如碳源贫乏时），蛋白质水解物或氨基酸等也可被微生物作为碳源使用。 8 1、糖类  发酵培养基中使用最广泛的碳源;  主要有葡萄糖、糖蜜和淀粉糊精等 糖类 来 源 葡萄糖 乳糖 淀粉 蔗糖 纯葡萄糖、水解淀粉 纯乳糖、乳清粉 大麦、木薯、红薯、玉米、马铃薯等 甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、粗红糖、精白糖等 工业上常用的糖类及来源 淀粉水解糖的制备是发酵生产的一项重要工艺，将在后面详细介绍 9 葡萄糖 最易利用，几乎所有微生物都能利用 葡萄糖常作为培养基的一种主要成分。  但过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以至培养基中的溶解氧不能满足需要，抑制微生物的生长和产物的合成。 10 糖蜜  制糖的结晶母液，它是制糖工业的副产物;  含有丰富的糖、氮类化合物、无机盐和维生素等，是微生物发酵培养基价廉物美的碳源;  糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达45-50%。水分含量：18-36%。粗蛋白质含量2.5-8%，粗灰分4%-12.5%。  糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜，二者在糖的含量和无机盐的含量上有所不同，即使同一种糖蜜由于加工方法不同其成分也存在差异，因此使用时要注意。 11 淀粉  多糖，也是常用的碳源;  需经胞外酶水解成单糖后再被吸收利用;  使用淀粉可克服葡萄糖代谢过快的弊病，价格也比较低廉，在发酵工业中被普遍使用。  常用的淀粉为玉米、甘薯、马铃薯、木薯淀粉。 12  油和脂肪也能被许多微生物作为碳源和能源  这些微生物都具有比较活跃的脂肪酶，在脂肪酶的作用下，油或脂肪被水解为甘油和脂肪酸，在溶解氧的参与下，进一步氧化成CO2和H2O，并释放出大量的能量。  当微生物利用脂肪作为碳源时，要供给比糖代谢更多的氧，不然大量的脂肪酸和代谢中的有机酸会积累，从而引起pH的下降，并影响微生物细胞中酶的活力。  常用豆油、菜油、葵花籽油、猪油、鱼油、棉籽油等 2、油和脂肪 13  随着石油工业的发展，发酵工业的碳源也有所扩大。  正烷烃（一般指从石油裂解中得到的14-18碳的直链烷烃混合物）已用于有机酸、氨基酸、维生素、抗生素和酶制剂的工业发酵中。 3、烃和醇类 14 二、氮源 有机氮源 豆饼（粕）粉、花生饼粉、鱼粉、蚕蛹粉、酵母粉、玉米浆、尿素等 无机氮源 铵盐、硝酸盐等 （由于细胞内的含氮物质都以氨基或亚氨基的形式存在，故铵态氮可以直接用于合成细胞物质；而硝态氮需还原成氨后才能被利用） 15  氮源物质常对培养液pH产生影响 (NH4)SO4  2NH3 + H2SO4 NaNO3 + 4H2  NH3 + 2H2O + NaOH 反应中所产生