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噬菌体效价测定（P143）
噬菌体效价的测定 (p143) 噬菌体效价（滴度）：1ml培养液中所含活噬 菌体的数量，用PFU表示。 噬菌体效价测定方法：双层琼脂法。 噬菌体效价的测定 培养指示菌 感 染 与半固体混合 计数噬菌斑 效价(PFUs) 大肠杆菌（Escherichia coli） 受体菌株 大肠杆菌噬菌体（1 0-2稀释液） 供体菌株 E.coli （λ+） ：CCTCC AB 2013329 （lambda噬菌体溶原株） E.coli （λ-）： CCTCC AB 2013330 （lambda噬菌体敏感株） 噬菌体裂解液的制备 7.5ml E.coli （λ+） 菌液离心 菌沉淀用1ml无菌水悬浮 菌悬液加在无菌空平皿中央紫外照射15秒 加入LB培养液5ml 37℃暗培养3小时 加1 - 0.5ml氯仿震荡后离心 上清十倍稀释至10-2 感 染 噬菌体裂解液 1 0-2 培养指示菌 E.coli （λ-） 稀 释 10-5 、1 0-6、10-7 LB 感 染 0.1 ml 0.1 ml 4.8 ml 半固体培养基 倒入底层平板，凝固，37℃，ON 37℃温浴20分钟 底层培养基 半固体LB 噬菌体+受体 37℃培养 PFUs/ml 无菌小试管（带帽） 5支/组 无菌1ml移液管 20支/组 每组准备工作 LB半固体 4.5ml/管X5（带帽）/组 LB固体平板 5皿/组 LB液体培养基， 4.5ml/管X5（带帽）/组 教师准备工作 实验结果观察 噬菌体效价=PFU数 X 稀释倍数 X 10/ml 思考题 受体菌液与裂解液混匀后37度保温过程中,若剧烈震荡试管可能产生的结果,为什么?
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