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微生物工业用菌种
第4章 空气除菌的工艺及设备 空气中微生物的分布 空气除菌方法 过滤除菌的机理 空气过滤除菌的流程 介质过滤除菌的设备及计算 空气除菌的必要性 发酵工业中,绝大多数是利用好气性微生物进行纯种培养,空气则是微生物生长和代谢必不可少的条件。但空气中含有各种各样的微生物,这些微生物随着空气进入培养液,在适宜的条件下,它们会迅速大量繁殖,消耗大量的营养物质并产生各种代谢产物;干扰甚至破坏预定发酵的正常进行,使发酵产率下降,甚至彻底失败。因此,无菌空气的制备就成为发酵工程中的一个重要环节。空气净化的方法很多,但各种方法的除菌效果、设备条件和经济指标各不相同。实际生产中所需的除菌程度根据发酵工艺要求而定,既要避免染茵,又要尽量简化除菌流程,以减少设备投资和正常运转的动力消耗。本章将讨论合理选择除菌方法,决定除菌流程以及选用和设计满足生产需要的除菌设备等。 4.1空气中微生物的分布和发酵工业对空气无菌程度的要求 4.1.1无菌空气 发酵工业应用的“无菌空气”是指通过除菌处理使空气中含微生物含量降低在一个极低的百分数,从而能控制发酵污染至极小机会。满足发酵生产的空气称为“无菌空气”。 4.1.2空气中微生物的分布 气候条件 人类活动 垂直高度 各地空气中所悬浮的微生物种类及比例各不相同,数量也随条件的变化而异,一般设计时以含量为103~104个/m3进行计算。 4.1.3发酵对空气无菌程度的要求 各种不同的发酵过程,由于所用菌种的生长能力、生长速度、产物性质、发酵周期、基质成分及pH值的差异,对空气无菌程度的要求也不同。如酵母培养过程,其培养基以糖源为主,能利用无机氮,要求的pH值较低,一般细菌较难繁殖,而酵母的繁殖速度又较快,能抵抗少量的杂菌影响,因此对无菌空气的要求不如氨基酸、抗生素发酵那样严格。而氨基酸与抗生素发酵因周期长短不同,对无菌空气的要求也不同。总的来说,影响因素是比较复杂的,需要根据具体情况而订出具体的工艺要求。一般按染菌机率为10-3来计算,即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1~2次染菌。 注意 虽然一般悬浮在空气中的微生物,大多是能耐恶劣环境的孢子或芽孢,繁殖时需要较长的调整期。但是在阴雨天气或环境污染比较严重时,空气中也会悬浮大量的活力较强的微生物,它进入培养物的良好环境后,只要很短的调整期,即可进入对数生长期而大量繁殖。一般细菌繁殖一代仅需20~30min,如果进入一个细菌,则繁殖15h后,可达109个。如此大量的杂菌必使发酵受到严重干扰或失败,所以计算是以进入1、2个杂菌即失败作为依据的。 4.1.4空气含菌量的测定 空气是许多气态物质的混合物,主要成分是氮气和氧气,还有惰性气体及二氧化碳和水蒸汽。除气体外,尚有悬浮在空气中的灰尘,而灰尘主要由构成地壳的无机物质微粒、烟灰和植物花粉等组成。一般城市灰尘多于农村,夏天多于冬天,特别是气候温和湿润地区,空气中的菌量较多。据统计,大城市每立方米空气中的含菌数约为3000~10000个。要准确测定空气中的含菌量来决定过滤系统或查定过滤空气的无菌程度是比较因难的。 4.2 空气除菌方法 对空气的要求随发酵类型不同而异 厚层固体曲需要的空气量大,压力不高,无菌度不严格,可选用离心式通风并经适当的空调处理(温、湿)就可以了; 酵母培养消耗空气量大,无菌度也不十分严格,但需要一定压力以克服发酵罐的液柱阻力,所以一船采用罗茨鼓风机或高压离心式鼓风机通风; 而对于密闭式深层好气发酵则需要严格的无菌度,必须经过除菌措施,由于空气中含有水分和油雾杂质,又必须经过冷却、脱水、脱油等步骤,因此,无菌空气的制备须经过一个复杂的空气处理过程。同时,为了克服设备和管道的阻力并维持一定的罐压,需采用空气压缩机。 空气除菌的方法 4.2.1辐射灭菌 α射线、X射线、β射线、γ射线、紫外线、超声波等从理论上讲都能破坏蛋白质,破坏生物活性物质,从而起到杀菌作用。但应用较广泛的还是紫外线,它在波长为226.5~328.7nm时杀菌效力最强,通常用于无菌室和医院手术室。但杀菌效率较低,杀菌时间较长。一般要结合甲醛蒸汽等来保证无菌室的无菌程度。 4.2.2加热灭菌 虽然空气中的细菌芽孢是耐热的,但温度足够高也能将它破坏。例如悬浮在空气中的细菌芽孢在218°C下24s就被杀死。但是如果采用蒸汽或电热来加热大量的空气,以达到灭菌目的,这样太不经济。利用空气压缩时产生的热进行灭菌对于无菌要求不高的发酵来说则是一个经济合理的方法; 采用加热灭菌法时,要根据具体情况适当增加一些辅助措施以确保安全。因为空气的导热系数低,受热不很均匀,同时在压缩机与发酵罐间的管道难免有泄漏,这些因素很难
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