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间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 特异结合 抗原抗体复合物 NS ＋ 致敏颗粒 无凝集颗粒 阳性 第30页/共47页 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 无结合 抗原抗体分散 NS ＋ 致敏颗粒 有凝集颗粒 阴性 第31页/共47页 第32页/共47页 第33页/共47页 SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏------测抗原 一、协同凝集试验 第34页/共47页 原理图 IgG SPA SPA- IgG 待测抗原 SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒 混合 加入 第35页/共47页 抗球蛋白试验又称 Coombs试验 二、抗人球蛋白凝集试验 第36页/共47页 1945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验，检测抗红细胞不完全抗体的一种非常经典的方法。 二、抗人球蛋白凝集试验 第37页/共47页 1、直接Coombs试验 不完全抗体 检测红细胞上抗体 第38页/共47页 2、间接Coombs试验 检测血清中的抗红细胞抗体 第39页/共47页 临床应用： 在输血上的应用 血型抗原抗体的检查 对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断 对溶血性贫血的研究 对细菌或立克次体的不完全抗体检查 抗人球蛋白凝集试验 第40页/共47页 自身红细胞凝集试验 未经致敏的受检者新鲜红细胞 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体 临床应用：HIV检测、HBV检测 第41页/共47页 自身红细胞凝集试验 第42页/共47页 胶乳凝集试验 第43页/共47页 第44页/共47页 明胶凝集试验 将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集 第45页/共47页 间接凝集反应的应用 抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。 抗体的检测 　　检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。 第46页/共47页 小结 凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。 可以分为直接凝集反应和间接凝集反应。 在临床检验中最常用的为间接血凝试验、胶乳凝集试验和明胶试验。 抗球蛋白试验又称为Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。直接Coombs试验用于病人红细胞上不完全抗体检测；间接Coombs试验用于检测游离的血清中的不完全抗体。 第47页/共47页 * * * * * * 1.解释凝集反应的概念。 2.解释直接凝集反应、间接凝集反应、协同凝集反应的原理。 3.说出抗人球蛋白试验的应用。 4.了解自身红细胞凝集。 第1页/共47页 凝集反应 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 第2页/共47页 抗原 抗原 排斥 抗原 抗体 凝集反应 抗原 抗原 抗原 凝集原：凝集反应中的抗原。 凝集素：凝集参与反应的抗体 第3页/共47页 反应阶段： 抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象 反应特点： IgM的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体 凝集反应 第4页/共47页 可见反应形成 第5页/共47页 第一节 直接凝集反应 直接凝集反应： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 第6页/共47页 + ? 方法评价：简便和快速、敏感度低，用于定性试验 临床应用：菌种鉴定、血清学分型、血型鉴定及抗体效价测定。 第一节 直接凝集反应 第7页/共47页 一、玻片凝集试验 + 第8页/共47页 第9页/共47页 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低 临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定 一、玻片凝集试验 第10页/共47页 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 二、试管凝集试验 第11页/共47页 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5 试管凝集试验原理 结果 1 2 3 4 5 6 7 菌液 第12页/共47页 试管凝集试验 第13页/共47页 结果 + 很小的凝集颗粒 混浊 - 无凝集现象 与对照相同 ++ 小、部分凝集块 中等混浊 +++ 大多凝集管底 轻度混浊 ++++ 大的凝集块 清亮 凝集程度 沉淀 上清 第14页/共47页 管底沉淀 凝集程度 最高稀释比例 待测血清的滴度 第15页/共47