超微结构基本知识座.pptxVIP

一 、取材、样品制备与课题设计密切相关;取材前要问几个问题: a 所要研究对象的解剖位置是否清楚?如海马….肾小球病变. b 要观察样品的外部还是内部结构？＿取材和固定前的处理不同（ＴＥＭ／ＳＥＭ），如肠上皮、牙齿髓腔的观察．．． c 是定量还是定性？ d 有横/纵向之分吗? 肌肉﹑神经等;２. 取材、固定;3.各类标本的取材;培养细胞:量的多少能做(培养瓶\孔板)；一般1mm3即可，１２或２４孔均可做ＴＥＭ／ＳＥＭ，其方法不同．ＳＥＭ细胞可更少．;二、超微结构观察与研究中值得注意的问题;3.半薄切片:补充上述缺陷. 生物样品的普通石蜡切片厚度为5微米左右,其观察深度远比超薄切片为大,即在石蜡切片和超薄切片之间不仅有观察范围大小的区别,也有观察厚度大小的显著差异.半薄切片厚度为1微米左右,一方面可为超薄切片定位,以选取电镜下观察部位,另一方面可供光镜观察标本的整体面貌. 通过LM 观察半薄切片可以检见通常在石蜡切片难以检见的形态结构,并据此可做出诊断.因为制作半薄切片的材料和技术操作过程不同于石蜡切片,而切片又较普通石蜡切片为薄,故其中某些组织成分得以较好保存和得以显示,有利于诊断. ;4.电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜，但电镜因需在真空条件下工作，所以很难观察活的生物，而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤。其他的问题，如电子枪亮度和电子透镜质量的提高等问题也有待继续研究。 ;三、几类常见细胞的超微结构特征及鉴定;如：分泌蛋白质的腺细胞富有粗面内质网和发达的高尔基复合体，巨噬细胞则有较多的溶酶体；构成肌组织的肌细胞，形态细长，含有大量纵行肌丝，是细胞收缩的物质基础；上皮组织则细胞排列紧密，具有吸收和保护等功能相关结构。又如消化管是连续的管道，而食管、胃、小肠和大肠的粘膜又各有特点，它们与各段的相应功能相关。因此，结构与功能相结合既能达到深入理解，融会贯通． ;１．神经元;大鼠脑神经细胞，胞核大，核常染色质及染色质间颗粒（黑“↑”）明显， 核仁大（白“▲”）。 ×14000 ;大鼠脑神经细胞，胞质内粗面内质网（黑“↑”）丰富， ???尔基体（黑“▲”）发达，细胞周边可见突触（白“↑”）。×20000 ;人脑白质中少突胶质细胞，核及细胞均略呈椭圆形，核相对较大， 胞质少，核糖体较多，其他细胞器少，邻近为神经毡。×16000 ;２．血管内皮细胞 ;内皮细胞超微结构的主要特点是胞质中有丰富的吞饮小泡，或称质膜小泡（plasmalemmal vesicle），直径60～70nm（图）。这些小泡是由细胞游离面或基底面的细胞膜内凹形成，然后与细胞膜脱离，经细胞质移向对面，又与细胞膜融合，将小泡内所含物质放出，故小泡有向血管内外输物质的作用，细胞质内还可见成束的微丝和一种外包单位膜的杆状细胞器，长约3μm直径0.1～0.3μm，内有6～26条直径约15nm左右的平行细管，称Weibel-Palade小体（W-P小体）W-P小体是内皮细胞特有的细胞器，一般认为它是合成和储存与凝血有关的第Ⅷ因子相关抗原（factor Ⅷ related antigen, F Ⅷ）的结构（图） ;３上皮细胞 ;人皮肤鳞状上皮细胞，胞质内有丰富的张力原纤维（白“↑”）， 细胞间有桥粒（黑“↑”）。×20000 ;兔输卵管纤毛柱状上皮， 可见纤毛柱状细胞（黑“▲”）及浆液粘液分泌细胞（白“▲”）。 ;肠粘膜上皮细胞间可见高脚杯状粘液分泌细胞（黑“↑”），核小（白“↑”），在基底处。 ×5000 ;人胃粘膜上皮中神经内分泌细胞，胞质内可见大量神经内分泌颗粒，细胞间可见桥粒（黑“↑”）。×6000 ;4.肌细胞;免输卵管肌壁平滑肌细胞，胞质内可见密布肌细丝,少量密体（黑“▲”）及密斑（黑“↑”）,质膜外有基板，细胞间有连接。×30000 ;细胞内可见线粒体（黑“▲”）及肌原纤维，肌节（黑“↑”）中Ａ带、Ｉ带、Ｈ带及Ｚ线、Ｍ线都清楚可见。　　 Ｘ 33000 ;豚鼠心肌细胞，可见线粒体（黑“▲”）、肌原纤维（黑“↑”）、Ｔ管（白“↑”）及肌浆网（白“▲”）。 ×21000 ;5．肿瘤细胞 ;低分化;鼻咽癌未分化型，癌细胞大小形状不一，仅见个别原始连接（黑“↑”）。 ×6000 ;鼻咽癌，癌细胞大小不一，形态各异，胞质中可见较多粗面内质网及张力原纤维（黑“↑”）。 ×10000 ;间变型室管膜瘤，瘤细胞及核大小、形状差异很大。× 6000 ;谢 谢 ！