rna干扰靶向沉默stat1基因对宫颈癌细胞hela生物学特性影响-effect of rna interference targeting silencing stat1 gene on biological characteristics of cervical cancer cell hela.docxVIP

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2018-06-01 发布于上海
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rna干扰靶向沉默stat1基因对宫颈癌细胞hela生物学特性影响-effect of rna interference targeting silencing stat1 gene on biological characteristics of cervical cancer cell hela.docx

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rna干扰靶向沉默stat1基因对宫颈癌细胞hela生物学特性影响-effect of rna interference targeting silencing stat1 gene on biological characteristics of cervical cancer cell hela

Helacells.TransfectedcellswereselectedbyG418tobecomestablytransfectedcellsbyusingthebiotechnologiesofcloning.TheexpressionlevelsofSTAT1mRNAandproteinweredeterminedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaction（RT-PCR）andWesternblotting.Results:STAT1-shRNAexpressionvectorwastransfectedintoHelacellssuccessfully.TheexpressionlevelofSTAT1mRNAandproteinissignificantlydecreased（P＜0.05）.Conclusion:STAT1-shRNAexpressionvectoreffectiveininhibitingtheexpressionofSTAT1incancercelllineHela.SuccessfullyestablishedstabletransfectedSTAT1-shRNAeukaryoticexpressionvectorcellline(STAT1-shRNA-Hela)andstablecelllinetransfectedwithemptyvector(Mock-Hela)layingthefoundationforsubsequentexperiments.【Keywords】STAT1RNAiCervicalcancercelllineHelaPartⅢEffectsonbiologicalbehaviorsofHelacellsbyRNAinterferencetargetingSTAT1genessilencingObjective:ToexploretheeffectsofSTAT1-shRNAonbiologicalbehaviorsofHelacells,suchasproliferationmigrationandinvasion,byRNAinterferencetargetingSTAT1genesilencing.Methods:cellularproliferationwasexaminedbyMTTassay.TranswellchambermodelwasusedtoassesstheeffectoftheSTAT1-shRNAonthemigrationandinvasionofHelacells.Results:(1)Comparedwithgroupsincludingtransfectionreagentcontrol(Mock-Hela)andblankcontrol（Helacells）,theproliferationofexperimentalgroup(STAT1-shRNA-Hela)wasincreased(P＜0.05).(2)Invitromigrationassay,thenumberoftransmembranecellsofexperimentalgroupwas(25.66±1.15),whilethenumberoftransfectionreagentcontrolandcontrolgroupwas(18.33±1.52),(16±1)respectively.Thenumberofpenetratingcellsinexperimentalgroupismorethancontrolgroups(P0.05).Therewasnosignificantdifferencebetweencontrolgroups(P0.05).（3）Invitroinvasionassay,thenumberoftransmembranecellsofexperimentalgroupwas（10±1）,whilethenumberoftransfectionreagentcontrolandcontrolgroupwas（5.33±0.58）,（4±1）respectively.Thenumberofpenetratingcellsinexperimentalgroupwasmorethancontrolgroups(P0.05).Therewasnosignificantdifferencebetweencontrolgroups(P0.05).Conclusion:ShRNAtargetingSTAT1genecanpromotetheproliferationofHelacells,