沉默twist基因对hct116细胞株体外增殖及侵袭性影响研究.pdfVIP

目 录 ．………………．…………………．…．．………．…．．1 …………………………………………………．．．．…．．…．．．．．．．：； 因对HCTl 16细胞株体外增殖及侵袭性影响的研 前言………………………………………………………………………6fj【J舌……………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………7 结果……………………………………………………………………．．16 附图……………………………………………………………………．．18 附表……………………………………………………………………．．23 讨论……………………………………………………………………．．24 结论……………………………………………………………………．．26 参考文献………………………………………………………………．．27 综述Twist基因低表达与大肠癌的发生、发展及转移的研究…………．．29 致 谢……………………………………………………………………．．41 个人简历……………………………………………………………………．．42 袭性影响的研究 常见的消化道恶性 的发病是一个多因 瘤的发生和发展是 正常的细胞在受到包括生物、物理、化学等各种外界因素作用后发生一系 列分子水平变化，最终导致表型变化，成为肿瘤。肿瘤的发生，也是细胞 增殖与细胞凋亡平衡失调的结果。结直肠癌的发生发展与细胞凋亡有密切 的关系。在对细胞凋亡机制的研究中，人们发现，碱性螺旋一环一螺旋蛋白 (basic helix．100p．helix 基因的特性，而且能通过多种途径抑制细胞凋亡过程，促进上皮一间质转 化(EMT)的发生及血管的形成，同时也导致肿瘤的发生、发展。研究表 明，Twist过高表达于各种实体瘤中(包括乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤 以及骨肉瘤)，能够促进人乳腺癌和黑色素瘤细胞系的凋亡。也有研究证 实，Twist在人类乳腺癌MCF．7细胞株、结肠癌HCTl16细胞株、肾癌 等6种细胞系中，在结肠癌HCTl16细胞系中的表达最高，而在正常肝脏 16，SW480， 细胞L02中的表达最低。而我们之前的研究也表明在HCTl SW620三种结肠癌细胞系中，Twist基因在HCTl16细胞系中表达最高。 细胞株体外增殖及侵袭转移能力。本研究通过下调Twist基因的表达，观 察对人结肠癌HCTl16细胞株体外增殖及侵袭性的影响，进一步确定 Twist基因与结直肠癌发生，发展的关系。 方法：本研究将Twist 8 高表达结肠癌细胞系HCTl16中，分别做为干扰组和对照组，通过G41 SiRNA是否成 功沉默结肠癌HCTl 并绘制干扰组和对照组细胞的生长曲线，然后通过细胞划痕实验和 中文摘要 结果： 1 RT-PCR和Westernblot结果显示：干扰组细胞Twist基因的表达水平 显著低于对照组，差异有统计学意义(尸O．05)． 2通过MTT法绘制细胞生长曲线，结果显示，从第4天开始，干扰组细 胞生长速度明显低于对照组，差异有统计学意义(P0．05)。 3通过细胞划痕实验显示，划痕24小时后对照组细胞迁移了(25．24±