生猪重要疫病样品采集要求与实验室检测意义ppt课件.ppt

处理好所采的血液。采到血液后，应立即将注射器内的血液沿着贮藏血液的容器（试管或青霉素空瓶）徐徐注入，不能有气泡，也不能振荡，同时倾斜放置好。也可放在注射器内倾斜放置好后送检。若要送检血清，夏天在常温下放置一段时间，冬天要放置在25～37℃温水中一段时间，以利血清析出。若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。 耳静脉采血方法 1)将猪站立或横卧保定，或用保定器具保定。 2)耳静脉局部按常规消毒处理。 3)1人用手指捏压耳根部静脉血管处，使静脉充盈、怒张（或用酒精棉反复局部涂擦以引起其充血）。 4)术者用左手把持耳朵，将其托平并使采血部位稍高。 5)右手持连接针头的采血器，沿静脉管使针头与皮肤呈300～450角，刺入皮肤及血管内，轻轻回抽针芯，如有回血即证明已刺入血管，再将针管放平并沿血管稍向前伸入，抽取血液。 实验室检测策略 以前： 我们的误区 猪群发病了，采发病猪的血，化验。 结果：无所适从。 结论：化验无用，没有帮助。 缺乏有效的实验室支持，是造成盲目用药、 用苗的原因之一 服务承诺 服务口号： 快速、高效、及时 服务承诺： 对于已有检验方法的检验项目，48小时内给出准确检验结果； 对于尚无检验方法的项目，5个工作日内给予相关疫病的分子检测检测结果； 对使用过我公司研发的试剂盒的客户，第一时间安排专职的研究人员，提供全程技术支持服务； 生猪重要疫病样品采集要求与实验室检测意义 李峰 研究员 山东省滨州畜牧兽医研究院 山东省生猪创新团队滨州综合试验站 生猪重要疫病实验室检测技术研修班 分享内容 实验室检测的重要意义 实验室检测的主要内容 生猪主要疫病样品采集要求与注意事项 其他样品采集要求 实验室检测的重要意义 明确所发生的疾病种类： 传染性因素：细菌、病毒、支原体、其它微生物； 非传染性因素 单纯感染 /混合感染 是否为人兽共患病 病原分子生物学检测分析 区域优势毒株基因型分析 病原分子进化与演变 病原分子序列与疫苗比对 细菌培养与药物敏感性试验 细菌初步鉴定：毒力、血清型 药物敏感性试验：解决合理用药问题 自家疫苗试制：技术储备 开展抗体检测 疫苗免疫抗体监测与评价 野毒感染状况调查与评价：PRV、传胸 免疫程序调整与优化：母源抗体检测 疫病净化评价 类别 免疫场 非免疫场 合计 ≧30头 30头 ≧30头 30头 场 数 18 17 2 6 43 阳性场数 10 6 1 3 20 阳性场占比% 55.56 35.29 50.0 50.0 46.51 样品数 187 66 22 28 303 阳性数 43 17 7 10 77 样品阳性率% 22.99 25.76 31.82 35.71 25.41 猪伪狂犬gE抗体检测情况统计 实验室检测的主要内容 细菌的染色 ↓ 形态学观察 ↓ 培养基的制备 ↓ 细菌分离培养 ↓ 纯化 ↓ 细菌的生化试验 ↓ 药物敏感试验 病猪的剖检 病猪病料的采集、保存 总RNA的提取 ↓ 反转录 ↓ 聚合酶链式反应（PCR） 猪瘟病毒抗体 猪伪狂犬病病毒gPI抗体(野毒) 猪流感血凝抑制试验 猪细小病毒病乳胶凝集试验（LAT） 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体 ↓ DNA提取 ↓ PCR 血清学检测 分子诊断 细菌分离 ↓ 结果分析 生猪主要疫病样品采集要求 采样原则 1、适时采集 ：尽可能采集到新鲜样品。用于分离病原体的，须在病初发热期或出现典型临诊症状时采集；若制备血清，空腹时采血。尸体上采样，应在动物死后立即采集。 2、典型采样 ：样品具有代表性。选择典型动物，即未经药物治疗、病状典型的动物；选择典型材料，病原体含量最高的材料；尸体采样，采集有病变组织、器官或病变最明显、最典型的部位。 3、合理采样 ：群体发病时，至少采5头动物的病料。每一种样品应有足够的数量。 4、无菌采样 ：无菌操作，尤其是供微生物学检查和血清学检查的样品 5、安全采样：注意人员安全，防止感染，防止病原扩散造成环境污染。 病理剖检 腹部朝上平放 切开四肢 颈部淋巴结 股内则淋巴结 剖检颌、颈部 皮下组织、颌下淋巴结观察 横切胸骨柄，暴露胸腹腔 观察胸腹腔器官变化 纵切胸骨柄 取出胸腔器官 剖开颅腔 暴露脑部 器官 症状/病变 疑似疾病 体表 耳尖、屁股、腹部发紫 微循环障碍：猪瘟、弓形体 背部发紫，规则菱形，边缘整体 猪丹毒 全身通红 链球菌 鼻子流血和/泡沫 胸膜肺炎 背部点状出血、毛孔出血、皮肤发白 附红细胞体、蓝耳病 会阴、臀部、四肢出现周边紫色，中间白色圆形、边缘紫褐色纽扣状坏死 圆环病毒 依据剖检病变推导可能发生疫病 淋巴结 颌下淋巴结肿大，出血性坏死 全身淋巴结有大理石样出血变化 腹股