芽孢杆菌ah-e-1抗真菌肽的分离纯化 性质及产生条件研究-isolation, purification and production conditions of antifungal peptides from bacillus ah - e - 1.docxVIP

芽孢杆菌ah-e-1抗真菌肽的分离纯化 性质及产生条件研究-isolation, purification and production conditions of antifungal peptides from bacillus ah - e - 1.docx

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
芽孢杆菌ah-e-1抗真菌肽的分离纯化 性质及产生条件研究-isolation, purification and production conditions of antifungal peptides from bacillus ah - e - 1

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得天津大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津大学有关保留、使用学位论文的规定。特授权天津大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。(保密的学位论文在解密后适用本授权说明)学位论文作者签名:导师签名:签字日期:年月日签字日期:年月日摘要真菌引起的病害日益严重,芽孢杆菌可产生多种抗真菌物质而受到人们的重视。芽孢杆菌AH-E-1为一株新发现的菌株,前期研究表明它能有效抑制白色念珠菌。为进一步研究它的抗真菌活性和寻找新的抗真菌物质,本文对芽孢杆菌AH-E-1及其发酵上清液进行研究,并对其产生的抗真菌肽的分离纯化和性质进行研究,最后对产生抗真菌肽的发酵条件进行初步优化。研究内容如下:采用对峙法、覆盖法、插片法等对芽孢杆菌AH-E-1及其发酵上清液的抗菌活性进行研究,发现该菌株能显著抑制13种植物致病真菌及11种人类致病真菌;该菌株能引起真菌菌丝扭曲等变形;其产生的抗真菌物质存在于发酵上清液中,该发酵上清液能抑制丝状真菌孢子萌发及芽管和菌丝生长,与1mol/mL的两性霉素B相比该发酵上清液对白色念珠菌抑制作用更强。通过硫酸铵沉淀、有机溶剂萃取、等电点沉淀、有机溶剂沉淀和甲醇浸取对抗真菌物质进行粗提,经比较其效果选用甲醇浸取对抗真菌物质进行粗提。通过水合茚三酮等实验对抗真菌物质进行了初步定性。通过对抗真菌肽的三种分离纯化路线进行比较,选用超滤、反相色谱及HILIC色谱对抗真菌肽进行分离纯化,获得了色谱级的抗真菌肽。研究表明:抗真菌物质为肽类物质,其分子量约为500~1000Da,极性很强,不可电离,具有热稳定性、抗紫外线性和耐酸碱性,能耐氯仿等5种有机溶剂,并且对胰蛋白酶(1mg/mL)等6种酶稳定。通过单因素和正交实验对芽孢杆菌AH-E-1产生抗真菌肽的发酵条件进行初步优化,研究表明抗真菌肽的产生受多种因素影响,其中碳氮比增加有利于该抗真菌肽的产生,培养基、发酵时间、装液量、接种量和培养基初始pH这5个因素对该芽孢杆菌产生抗真菌肽的影响大小依次为:培养基发酵时间装液量=接种量培养基初始pH。较佳摇瓶发酵条件为:在500mL三角锥瓶中加入150mL初始pH值为7.0的PDB(200)培养基,接入10%的芽孢杆菌AH-E-1液体菌种,在37℃下培养24h。关键词:芽孢杆菌抗真菌肽分离纯化性质发酵条件ABSTRACTThediseasescausedbyfungiareincreasinglyserious.BecauseBacillussp.canproduceavarietyofantifungalagents,ithasattractedtheattentionofpeople.Bacillussp.AH-E-1wasanewlydiscoveredbacteriastrainwhichcouldstronglyinhibitCandidaalbicansinpreviousstudies.TofurtherstudyantifungalactivitiesofBacillussp.AH-E-1andscreennovelantifungalsubstances,westudiedBacillussp.AH-E-1andthefermentationsupernatantfromit.Subsequently,theisolation,purification,andcharacterizationoftheantifungalpeptidesproducedbyBacillussp.AH-E-1werestudied.Finally,wepreliminarilyoptimizedthefermentationconditionsofproducingtheantifungalpeptides.Thestudieswereasfollows:TostudytheantibioticactivitiesofBacillussp.AH-E-1anditsfermentationsupernatant,confrontationmethod,overlayassay,thecoverslipinsertionmethodandsoonwereused.Thestudiesshow

您可能关注的文档

文档评论(0)

peili2018 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档