优化方案2012高考生物总复习第一部分微生物的利用 浙科版选修1 ppt课件.pptVIP

* 第一部分 微生物的利用 高频考点突破 命题视角剖析 即时达标训练 第一部分 微生物的利用 高频考点突破 微生物的营养及无菌技术 1．培养基 (1)种类 按培养基的物理性质分为 ①液体培养基：配制成的液体状态的基质，一般用于生产。 ②固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)，配制成的固体状态的基质，琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。 (2)培养基配方及营养要素 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 2．无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 (2)无菌操作 ①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒，操作者的手用酒精消毒。 ②将实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 大肠杆菌的培养和分离 1．大肠杆菌 (1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2．培养：实验中用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌。 3．分离(实验部分) 培养基灭菌 ↓ 倒平板 ↓ 接种 ↓ 50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌 将固体培养基倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12 h 划线分离 ↓ 培养观察 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿 培养皿倒置(盖在下面)，放在37 ℃恒温培养箱中培养12～24 h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落 4.保存菌种：用接种环取出单个菌落，划线法接种在斜面培养基上，37 ℃培养24 h后，4 ℃冰箱保存。 【易误警示】　①在倒平板过程中，不能将培养基溅在皿壁与皿盖上，防止杂菌污染。 ②本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养，以确定是否有杂菌污染。 ③培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染。 5．纯化大肠杆菌的方法 (1)划线分离法(方法简单易操作)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面(也是分离纯化的方法)。在第1次划线后都从上次划线末端开始,目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。 (2)涂布分离法(操作复杂，单菌落更易分开)：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌的标准菌落。 分离以尿素为氮源的微生物 1．实验原理：脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，利用尿素作为其生长的氮源。 2．实验目的：从土壤中分离出能利用尿素的细菌,了解它在生态平衡中的作用，并与LB全营养培养基做对照。 3．实验步骤： (1)制平板：在酒精灯火焰旁将LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒在两个培养皿中，超净台摇匀，平放至凝固。 (2)制备细菌悬液：将1g土样依次稀释出10～2、10～3、10～4和10～5土壤稀释液，备用。 (3)用涂布分离法分离细菌：取10～4和10～5土壤稀释液，分别加到LB培养基和尿素培养基的培养皿中，再用刮刀将菌液涂布到整个平面上。 (4)培养：将培养皿倒置，在37℃恒温培养上24～48h。 (5)观察：全营养培养基中有较多的菌落，而尿素为氮源的培养基平板中只有少量菌落。 【特别提示】　选择培养基 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。 在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。 培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 命题视角剖析 视角1 紧扣教材重点 微生物的分离 (2009年全国卷Ⅱ改造)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具