干细胞标志物ppt课件.ppt

干细胞标志物作用 分离鉴定干细胞的参考依据 干细胞内分类的依据 各种肿瘤干细胞均具有不同的肿瘤干细胞标志物,如CD34‘+CD38’-Thy‘-是白血病干细胞的表面标志；Lin’-ESA‘+B38.1’+CD44‘+CD24’-/low被认为是乳腺癌干细胞的特征；Singh等分离出了具CD133‘+的脑肿瘤干细胞等等 参与干细胞的分化调控 维持干细胞的自我更新和多能性 参与机体重要的生理和病理过程 干细胞标志物检测的方法 荧光标记细胞分选（FACS） 免疫磁珠分离（MACS） 亲和吸附柱分离（CEPRATE） 探针技术 生物素-亲和素系统的ABC法 酶免疫法 各种干细胞的筛选标志汇总 名称 筛选标志 胚胎干细胞 ? 造血干细胞 ? 骨髓间充质 干细胞 表皮干细胞 神经干细胞 ? 肝干细胞 ? 胰岛干细胞 小肠干细胞 脂肪干细胞 ? 角膜干细胞 ? 精原干细胞 鼠SSEA-1、ALP、Oct-4、lamin A-；人：SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-81、GCTM-2、 Oct-4和ALP、端粒酶、lamin A- CD34、CD14、CD45、CD133（或AC133）、KDR、c-kit、Thy、 CD38-、Lin-、HLA-、DR-、 CD45RA-、CDT1- SH2(CD105)、SH3、SH4、STROL-1、SB10(CD-166)、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、 CD120A、CD124、CD45-、CD34-、CD14- β1 Integrin、α6 Integrin、CK19、CK18-、CK20- 、CK15（毛囊干细胞） Nestin、EGF受体、FGF-2受体、α6 Integrin、β1Integrin、prominin-1、波形蛋白、 RNA结合蛋白、Musashi、RC1抗原 AFP、albumin、CK19、 CK17、CK18、α6 Integrin、β1Integrin 、Thy-1、c-kit、CD34 、 TO-、 G6P- PDX-1、HNF3β、Ngn3、IS1-1、TH Tcf4、Ifs、CK8、CK19 CD10、CD13、CD29、CD49、CD55、CD59、CD105、CD166、CD14-、CD16-、CD45-、CD56-、 CD61-、CD62E-、CD104-、CD106-、HLA-DR- p63、ABCG2、β1Integrin、EGF受体、CK19、α-enolase、Cx43-、CK3-、CK12-、involucrin-、nestin-、E-cadherin- Kit配体/c-Kit受体系统、α6 Integrin、β1Integrin及其抗体 常见的干细胞标志物 Oct-4 SSEA AKP TRA CD34 CD133（或AC133） Sca-1 KDR c-kit Thy STRO-1 CD105 CD166 CD44 CD29 ABCG-2 Nestin ABCG2（ATP-binding cassette superfamily G member 2） ABCG2是ABC转运体家族的成员，广泛存在于各种干细胞上，其特异性表达决定了SP（side population）细胞的Hoechst阴性染色表型。ABCG2是首先定位在乳腺癌细胞系上。 ABCG2在CD34阴性细胞上出现的几率最大，但细胞表达CD34后，ABCG2下调。ABCG2的下调也表现在很多造血祖细胞上。因此在原始HSC的分离鉴定上，ABCG2比CD34更有希望做为较好的标志物。 ABCG2在SP细胞上的专一表达提示ABCG2可能成为是成体多能干细胞阳性筛选的潜在标志物。ABCG2在干细胞发育生物学里也扮演着一定的功能上的角色。 Oct-4 Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4）属POU转录因子一员，由Pou5fl基因编码产生，目前被广泛的应用于鉴定ES细胞是否处于未分化状态。最初鉴定为DNA结合蛋白，可通过顺式元件活化基因转录。它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。 ES的分化导致Oct-4的下调。Oct-4可能是所有哺乳动物体内多能细胞发育阶段的调节分子，因此也成为检测细胞是否具有多能行的一个标志分子。 SSEAs（stage-specific embryonic antigens） SSEAs即阶段特异性胚胎抗原，是一种糖蛋白，常表达于胚胎发育早期，在未分化的多能干细胞中SSEA也常为阳性。在鼠和人的ES细胞之间它的表达存在种属差异性。 小鼠ES：SSEA-1 +，SSEA3 - ，SSEA4 - 源于IPM的人ES：SSEA-1 -，