二细胞工程.ppt

第62页/共73页 第63页/共73页 第64页/共73页 第65页/共73页 第66页/共73页 第67页/共73页 第68页/共73页 第69页/共73页 第70页/共73页 第71页/共73页 第72页/共73页 第73页/共73页 10.2.2肿瘤形成的外因 化学致癌物 生物因素 物理致癌 第30页/共73页 第31页/共73页 第32页/共73页 第33页/共73页 普通光学显微镜 第34页/共73页 荧光显微镜及其观察效果（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色 ） 第35页/共73页 激光共聚焦扫描显微镜 （蓝色为细胞核，绿色为微管 ） 第36页/共73页 微分干涉差显微镜效果（硅藻） 第37页/共73页 电子显微镜和超薄切片机 第38页/共73页 内质网透射电镜图（伪彩色） 第39页/共73页 肌动蛋白纤维的负染电镜照片 第40页/共73页 冰冻蚀刻电镜照片 第41页/共73页 扫描电镜和类血细胞照片 第42页/共73页 尼康NT-88NE显微操作/注射仪 第43页/共73页 第44页/共73页 第45页/共73页 第46页/共73页 第47页/共73页 第48页/共73页 第49页/共73页 第50页/共73页 第51页/共73页 第52页/共73页 第53页/共73页 第54页/共73页 第55页/共73页 第56页/共73页 第57页/共73页 特征 原核细胞 真核细胞 细胞膜 有（多功能） 有 核膜 无 有 染色体 由一个环状DNA分子构成的单个染色体，DNA不与或很少与蛋白质结合 2个染色体以上，染色体由线状DNA与蛋白质组成 核仁 无 有 线粒体 无 有 内质网 无 有 高尔基体 无 有 溶酶体 无 有 核糖体 70S 80S 光合作用 蓝藻含有叶绿素a，细菌有菌色素 叶绿素a、b 核外DNA 细菌具有裸露的质粒DNA 线粒体DNA、叶绿体DNA 细胞骨架 无 有 第58页/共73页 第59页/共73页 第60页/共73页 植物愈伤组织 第61页/共73页 第一节 概述 1.细胞工程的应用 紫杉醇、动物蛋白、干细胞、组织培养 2.细胞工程与基因工程的区别 细胞工程：从整体动物或植物上分离得到细胞，然后将细胞在反应器中进行目的产品的生产 基因工程：将细胞进行修饰（整合目的基因）再发育成动植物整体或组织，然后以该整体或部分为反应器生产目的产品。 第1页/共73页 第二节 细胞的基本概念 1. 细胞是生命活动的基本单位 细胞是构成有机体的基本单位 细胞是代谢与功能的基本单位：细胞具有独立的、有序的自控代谢体系 细胞是有机体生长发育的基础：有机体生长是以细胞增殖与分化为基础的 细胞具有遗传的全能性：单个的植物生殖细胞或单个体细胞、未受精的两栖类动物卵细胞可经处理发育成完整的个体 第2页/共73页 2.细胞的基本共性 所有细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜 所有细胞都有两种核酸：DNA和RNA 都有核糖体 所有细胞增殖都以一分为二的方式进行分裂 第3页/共73页 3. 细胞生物学的研究方法 3.1 细胞形态结构的观察方法 3.1.1光学显微技术 光学显微镜的分辨率受到介质折射率和光波长的影响 普通光学显微镜 荧光显微镜 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一 第4页/共73页 激光共聚焦扫描显微镜 激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态，也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量，其原理是利用激光作扫描光源，逐点、逐行、逐面快速扫描成像，由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光学显微镜的3倍 相差显微镜和微分干涉显微镜 第5页/共73页 3.2.2 电子显微镜 电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样，所不同的是前者用电子束作光源，用电磁场作透镜。另外，由于电子束的穿透力很弱，因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。这种切片需要用超薄切片机制作。电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成，图 第6页/共73页 3.2.2.1 制片技术 1）超薄切片 通常以锇酸和戊二醛固定样品，以环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片，切片厚度20~50nm，切片采用重金属盐染色，以增大反差，图 2）负染技术 负染就是用重金属盐（如磷钨酸、醋酸双氧铀）对铺展在载网上的样品进行染色；吸去染料，样品干燥后，样品凹陷处铺了一薄层重金属盐，而凸的出地方则没有染