微生物遗传复旦大学普通微生物学件.pptVIP

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微生物遗传复旦大学普通微生物学件

(1)菌丝联结(anastomosis) (2)形成异核体(heterocaryon) (3)核融合(nuclear fusion)或核配(caryogamy) (4)体细胞交换(somatic crossing-over)和单倍体化 准性生殖过程 第128页/共132页 核配:异核体中的双核偶尔可以发生核融合,产生双倍体杂合子核。 菌丝联结:形态没有区别, 遗传性上有差别的两个同种亲本的单倍体体细胞间发生菌丝联结。 形成异核体:联结后,原有的两个单倍体核集中到同一个细胞中,形成双相异核体。异核体能独立生活。 体细胞交换和单倍体化:体细胞交换即体细胞中染色体的交换,也称有丝分裂交换。双倍体杂合子性状极不稳定,在其进行有丝分裂过程中,其中极少数核中的染色体会发生交换和单倍体化,从而形成了极个别具有新性状的单倍体杂合子。 第129页/共132页 第130页/共132页 准性杂交育种(breeding by parasexuality) ① 选择亲本:选择来自不同菌株的合适的营养缺陷型作为准性杂交的亲本。 ② 强制异合:用人为的方法强制两菌株形成异核体。 ③ 移单菌落:将培养皿上长出的这种单菌落移种到基本培养基[-]的斜面上。 ④ 验稳定性:就是检验新菌株究竟是不稳定的异核体,还是稳定的杂合二倍体。 ⑤ 促进变异 第131页/共132页 在上述工作的基础上,再经过一系列生产性状的测定,就有可能筛选到比较理想的准性杂交种。 第132页/共132页 原核生物的基因重组 通过转化、接合、转导等形式进行一部分物质转移和基因重组。 特点: ① 片段性:仅一小段DNA序列参与重组; ② 单向性:即从供体菌向受体菌(或从供体基因组向受体基因组)作单方向转移; ③ 转移机制独特而多样:如接合、转化和转导、原生质体融合等。 第96页/共132页 1、转 化 (transformation) 受体细胞直接吸收了来自供体细胞的DNA片断,并把它整合到自己的基因组中,细胞部分遗传性状发生变化的现象叫转化。 通过转化而形成的杂种后代称转化子。 转化现象的发现是生物学上的一个杰出事件,不再怀疑DNA是遗传物质。 第97页/共132页 转化微生物的种类——多 原核生物 Streptococcus pneumoniae(肺炎链球菌) Haemophilus(嗜血杆菌属) Bacillus(芽孢杆菌属) Neisseria(奈瑟氏球菌属) Rhizobium(根瘤菌属) Staphylococcus(葡萄球菌属) Pseudomonas(假单胞菌属) Xanthomonas(黄单胞菌属)等。 真核微生物 Saccharomy cescerevisiae(酿酒酵母)、 Neu-rosporacrassa(粗糙脉孢菌)、 Aspergillusniger(黑曲霉)等。 第98页/共132页 (1)转化因子 转化是游离的DNA片断的转移和重组; 游离的DAN片断叫转化因子; 转化因子由供体提供; 自然情况下可由细菌细胞自行裂解产生,实验室里通过提取获得; dsDNA和ssDNA都具有转化能力,但只有ssDNA才能进入细胞内。 转化因子的本质是离体的DNA片段。一般只有15kb左右。 质粒DNA是良好的转化因子,但通常不能与核染色体发生重组。 第99页/共132页 受体细胞能接受转化的生理状态称为感受态 (2)感受态 感受态出现原因: 细菌失去部分细胞壁的结果; 细菌在细胞表面产生某种酶引起 只有处于感受态的细菌才能接受转化因子。 微生物不同,出现的时间不同,持续的时间也不同。 有些出现在指数期的后期,有些出现在指数期末和稳定期 第100页/共132页 感受态的决定因素 细胞遗传性决定 和菌龄有关 环腺苷酸Camp可提高1000 倍 Ca2+能促使细胞进入感受态 感受态因子——调节感受态的一种特异蛋白 是受体细胞表面上的一种蛋白质 功能:使转化因子结合在受体细胞表面 第101页/共132页 感受态细胞吸收外源DNA进入细胞,而发生基因重组的过程;通过转化而形成的重组子,也称为转化子( transformant ) 转化过程 感受态细胞(competence cell):某些微生物在特定环境条件下出现的,能够将胞外DNA片段吸收进入细胞的一种特殊生理状态; 第102页/共132页 转化 过程 供体(strR) dsDNA 感受态受体(strS) 酶解与吸收ssDNA 同源区段配对 单链整合 复制与分解 转化子(strR) 非转化子(strs) 第103页/共132页 转化的特点: 不需两个细胞直接接触,供体DNA提取出来,注入受体即可。 感受态细胞吸收DNA的特点: 小于15kb的DNA片段和质粒可以被感受

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