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  • 2018-06-03 发布于上海
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目基因表达

第一节 基因工程中的基因表达;一、制约目的基因表达的因素 二、阅读框架 三、启动子的影响 四、终止子的影响 五、翻译过程对表达的影响;绝大多数的基因工程研究是以获得基因表达产物为目标。在构建重组体DNA分子和选择宿主细胞时,还须考虑外源基因表达的问题。 要求外来的基因在宿主细胞中能够准确地转录和翻译,所产生的蛋白质在宿主细胞中不被分解,而且最好还能分泌到细胞外。;当基因工程的目的为研究基因结构与功能的关系时,需将天然的或人工突变的基因片段插入含有一定报告基因的载体的适当部位,比较天然基因与突变基因对表达水平的影响,从而分析目的基因的结构与功能的关系。;外源基因是否插入在正确的阅读框架; 目的基因的有效转录(如启动子的作用); mRNA的有效翻译(如SD序列等作用); 转录后,翻译后的适当的修饰和加工过程。;一、制约目的基因表达的因素 二、阅读框架 三、启动子的影响 四、终止子的影响 五、翻译过程对表达的影响;阅读框架是由每三个核苷酸为一组联接起来的编码序列。外源基因只有在它与载体DNA的起始密码相吻合时,才算处于正确的阅读框架之中。 构建一组载体,使每个载体与相对于起始密码ATG的转译位相的位点不同,分别与外源目的基因拼接,即可获得所有可能的三位位相,其中必有一种位相可以保证外源基因处于正确的阅读框架中。;用人工接头可以调节阅读框架。市售的同一酶切点的人工接头一般都有三种长度,经

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