抗乙肝病毒鸡卵黄免疫球蛋白的别离、提纯.pdfVIP

中文摘要 近年来，人们己越来越认识到卵黄是抗体生产的一种重要来源，并且鸡卵黄 免疫球蛋白(IgY)在作为免疫检测试剂、生化检潸试嗣及口服防治疾病的抗体 方面，具有许多哺乳动物产生的抗体所无法比拟的优点。因此，目前已经成功的 建立了多种IgY分离纯化的方法。但是，IgY还仍然未作为理想试剂和药物得到 J一泛应用，主要原因在于从卵黄中分离纯化IgY工艺复杂、耗时，且费用较高， 不适于大规模生产。本论文首次采用乙肝疫苗作为免疫原免疫产蛋鸡，获得了抗 乙肝病毒IgV抗体，所提取的抗乙肝病毒IgY经ELISA测定显示出较强的与抗原 结合的活性。并且摸索出一条简便可行的分离纯化IgY的方法。 经过研究发现：将卵黄液用pH=5的皴酸承溶液稀释tO倍，静置6小时后离 心分离，取上清液，然后分别用饱和度为55％和33％的(NIj4)tsO。进行盐析，粗 mol／LNaCI的p}I=7．0， 提后的组分经SephadexGl50凝胶柱层析。使用含有0。14 上样浓度为0．39／ml，分部收集，取第一个峰。经分光光度和SDS—PAGE测定， 制得的IgY样品，产量为10．2mg／ml卵黄，纯度大于95％。采用质谱手段测定了 抗—I毋VIgY的平均相对分子质量为166975Da。 由此可见，我们研究的水稀释一两步盐析一凝胶过滤法分离提纯的igY产量 大、纯度高，工艺简单，经济有效，为进一步的工业化奠定了基础。 关键词：鸡卵黄免疫球蛋白 分离提纯 水稀释 盐析 凝胶过滤 Abstract In the antibodies recent iSthe flourc七ofthe years，people陀co蛳zedyolk important and mammalian more has meritswhichtheantibodiesfrom havenot more,IgYmany and whenusedaSimmunedetection detection mediciRe reagent．biochemistry reagent hadbeenestablished．Becausethe of methodspurified process Therefore,many IgY is cannotbe scaleSoit purlfyingcomplex,expensive,igvproduced∞alarge IgY iSnot as VhBSwasusedasthe to appliedwidelyperfectreagent．HBV antigen Anti-HBVvirus immunizcchickensinout-work． Y(I譬Y) laying immunoglobulin