纸层析法-首都医科大学.PPTVIP

毒理学基础 首都医科大学 营养与食品卫生学 首都医科大学 实验二蔬菜中胡罗卜素的测定 (纸层析法) 营养与食品卫生学学系 一、实验目的 通过本次实验掌握用纸层析法分析蔬菜中胡萝卜素的含量 。 二、原理 蔬菜的植物色素包括叶绿素、叶黄素及胡萝卜素等，它们能被丙酮、石油醚溶液提取出来。将样品提取液进行纸上层析，由于胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色素分离；剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于450nm波长下定量测定。 三、方法 （一）仪器： 组织捣碎机 层析缸：可用标本缸代替（内径10cm、高25cm） 分光光度计 恒温水浴锅 点样器或微量注射器 新华滤纸：定性，快速或中速，16cm×20cm （二）试剂 （1）石油醚(沸程30～60℃，分析纯)：同时是展开剂。 （2）丙酮：分析纯。 （3）丙酮－石油醚混合液：3∶7(V/V)。 （4）无水硫酸钠：分析纯。 （5）5%硫酸钠溶液。 （6）β－胡萝卜素标准溶液：取50mg β－胡萝卜素标准品，溶于数ml氯仿中，然后以石油醚稀释至100ml，其浓度约为500μg/ml，将此溶液稀释10倍，即得50μg/ml得胡萝卜素标准应用液。 （三）样品的采集和处理 （1）粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。 （2）蔬菜与其他植物性食物：取可食部用水冲洗三次后，用纱布