RP-HPLC测定杜仲叶京尼平苷含量.docVIP

RP-HPLC测定杜仲叶京尼平苷含量 　　【摘要】 目的 建立反相高效液相色谱法同时测定杜仲叶京尼平苷含量的方法。方法 高效液相色谱法。结果 杜仲叶京尼平苷在0.26~2.60 μg范围内线形关系良好（r=0.999 9），平均加样回收率99.94%，RSD=0.6%（n=6）。结论 成分的峰分离效果好，其测定方法操作简便、准确、重复性良好，可作为杜仲叶中京尼平苷的质量控制方法。 　　【关键词】 RP-HPLC法；杜仲叶；京尼平苷 　　 　　The determination of geniposide in folium cortex eucommia by RP-HPLC 　　CHEN Yan-ping, SUN Li-wei, DENG Wei-qing.Xinxiang Central Hospital,Henan Xinxiang 453000，China 　　【Abstract】 Objective To establish a new RP-HPLC method for simultaneous determination of geniposide in folium cortex eucommia.Methods HPLC method.Results The standard geniposide(showed a good linear correlation within the concentration of 0.26~2.60 μg，（r=0.999 9），the average recovery of the sample was 99.94%，RSD=0.6%（n=6）.Conclusion The peaks of the components were separated effectly，the method is simple，accurate and reproducible and can be used for the quality control of geniposide in folium cortex eucommia. 　　【Key words】 RP-HPLC； Eucommia ulmoides oliv.leaf；Geniposide 　　 　　杜仲（Eucommia uimoides Oliv.）具有消炎抑菌、补肾降压、增强免疫功能及抗癌、抗疲劳、抗衰老、止痛镇静、补肝肾、强筋骨和安胎等作用［1，2］，是我国珍稀濒危二级保护植物，传统以皮入药。杜仲叶因其化学成分、药效与杜仲皮相似而代皮入药［3］，2005版中国药典将绿原酸定为评价杜仲叶质量优劣的主要技术指标［4］。有报道京尼平苷(geniposide,GP) 、京尼平苷酸( geniposidic acid,GA) 及绿原酸(chlorogenic acid,CGA) 为杜仲中重要的生物活性成分［5,6］，近几年，以杜仲叶为主开发了很多系列保健品、药品。为了有效地控制杜仲叶的质量，本文采用反相高效液相色谱法测定了杜仲叶中京尼平苷的含量。 　　 　　1 仪器与试药 　　 　　1.1 仪器 LC-10A型高效液相色谱仪（日本岛津），SPD-10AVP紫外检测器（日本岛津），浙大智达N2000色谱工作站，METILER TOLEDO AG135十万分之一电子天平；TP300超声波清洗机（北京天鹏电子新技术有限责任公司）。 　　1.2 试药 甲醇为色谱纯（天津四友精细化工试剂厂），水为超纯水，其余所用试剂均为分析纯；京尼平苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号 110749-200613，供含量测定用）；杜仲叶2008年9月采自河南省灵宝市中国林科院经济林研究开发中心杜仲研究基地，经笔者鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommia uimoides Oliv.的干燥叶。 　　 　　2 方法与结果 　　 　　2.1 色谱条件 Diamonsil-C??18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(17:83:1.5),流速1.0 ml/min；检测波长240 nm；柱温25℃。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取京尼平苷（GP）对照品1.3 mg置10 ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备与测定 精密称取杜仲叶粉末（过三号筛）约0.25 g，定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇溶液25 ml，称定重量，超声处理60 min 3次，放冷至室温用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，再经0.45 μm微孔滤膜滤过，备用。 　　2.4 线性关系的考察 分别精密吸取“2.2”项下的对照品溶液2、4、6、10、15、20