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- 2018-07-06 发布于浙江
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第 二 章核酸的结构和功能 Structure and Function of Nucleic Acid 一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 稀有碱基 嘌呤碱基的衍生物 : 黄嘌呤、次黄嘌呤、可可碱、咖啡因 核苷酸:可以是2 ’- ,3 ’- ,5 ’-核苷酸 脱氧核苷酸:可以是3 ’- ,5 ’-核苷酸 体内游离存在的有生物学活性的大多是 5’-核苷酸 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质: NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 第二节 核酸的一级结构 核酸的一级结构 定义: 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同,所以也称为碱基序列。 碱基的理化数据分析: A-T、G-C以氢键配对较合理 DNA纤维的X-线衍射图谱分析 三、DNA的功能 原核生物与真核生物mRNA的不同点 原核:多顺反子;真核:单顺反子 原核:直接生成;真核:加工修饰 二、转运RNA 蛋白质合成的接合器分子 细胞内分子量最小的一类核酸,70-120个核苷酸组成,占总RNA的15%。 tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基,如 DHU 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C 五、核酶 核酶(ribozyme) 是具有催化活性的RNA ,又称为催化性RNA 。 脱氧核酶(deoxyribozyme) 是具有催化活性的DNA ,又称为催化性DNA 。 一、一般性质 变性后其它理化性质变化: OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 热变性 解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。 第 五 节 核 酸 酶 Nuclease 定义:变性(denaturation)在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 方法:过量酸,碱,加热,变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 目 录 二、DNA的变性、复性 (一)DNA变性 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 例:变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应(hyperchromic effect):变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的现象。 目 录 目 录 意义: DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 原核生物DNA的高级结构 (二)DNA在真核细胞内的组装 真核生物染色体由DNA和蛋白质构成,其基本单位是 核小体(nucleosome)。 核小体的组成 DNA:约200bp 组蛋白:H1 H2A,H2B H3 H4 DNA是遗传信息的载体,以基因的形式荷载遗传信息,并作为基因复制和转录的模板。它是生命遗传的物质基础,也是个体生命活动的信息基础。 基因(gene)定义,是指DNA分子中的特定区段,其核苷酸排列顺序决定了基因的功能。 基因组(genome)定义,指一个细胞或生物所含有的全套基因。 第三节 RNA的结构与功能 Structure and Function of RNA RNA的种类、分布、功能 hnRNA 内含子 (intron) mRNA * mRNA成熟过程 外显子 (exon) 目 录 一 、信使RNA * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化,形成帽子结构:m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构,称为多聚A尾。 帽子结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能: * mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对
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