免疫荧光共聚焦显微镜 免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及.docVIP

免疫荧光共聚焦显微镜 免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及 [文章编号]100028861(2007)0320344203 免疫荧光双重染色的激光共聚焦显微镜样品制备及观察 路　菊,孙　玮,陈德英(第三军医大学高原军事医学系中心实验室,重庆400038) [摘　要]　目的　详尽介绍免疫荧光双标染色方法,为激光共聚焦显微镜观察提供理想的样品。方法　大鼠腹腔注射Brdu,40gΠL多聚甲醛灌注固定,取脑组织冰冻切片,用抗GFAP多克隆抗体孵育和FITC荧光标记二抗染色,再用抗Brdu单克 隆抗体孵育和Cy3荧光标记二抗染色,在激光共聚焦显微镜下连续断层扫描,图像叠加。结果　清晰可见处于增殖期(S期)细胞胞核呈红色荧光,星形胶质细胞胞质呈绿色荧光。结论　影响免疫荧光双重标记样品效果的环节和因素很多,其中最重要的因素是2个一抗的搭配和协调。 [关键词]　免疫荧光;双重标记;激光共聚焦显微镜[中图分类号]　R392.33　　　　[文献标识码]　A Preparationofimmunofluorescencedoublestainingsampleforlaserconfocalmicroscope LUJu,SUNWei,CHENDe2ying(CentralLaboratory,CollegeofHighAltitudeMilitaryMedicine,ThirdMil