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4.与其他分析仪器联用的定性方法 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱联用仪（组分的结构鉴定） Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 二、 定量分析 1 定量基础 或 单位峰面积(或单位峰高)的组分的量 绝对校正因子fi 相对校正因子 （1）归一化法： 特点及要求： 归一化法简便、准确； 进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 （2）外标法 外标法也称为标准曲线法。 特点及要求： 外标法不使用校正因子，准确性较高， 操作条件变化对结果准确性影响较大。 对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的快速分析。 （3）内标法 当只需测定试样中某几种组分,而且试样中所有组分不能全部出峰时,可采用此法。 内标法是将一定量的纯物质作为内标物，加入到准确称取的试样中，根据被测物和内标物的质量及其在色谱图上相应的峰面积比，求出某组分的含量。 内标物要满足以下要求： （a）试样中不含有该物质； （b）与被测组分性质比较接近，出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。 （c）不与试样发生化学反应； 内标法特点 (a) 内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。 (b) 每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。 例: 测定二甲苯氧化母液中乙苯和二甲苯含量，采用内标法。称取试样1500 mg，加入内标物壬烷150 mg，混合均匀后进样，测得如下数据： 组分 壬烷 乙苯 对二 甲苯 间二 甲苯 邻二 甲苯 峰面积 校正因子 98 1.02 70 0.97 95 1.00 120 0.95 80 0.98 计算样品中乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的含量。 解： 分配系数 K 的讨论 一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； 试样一定时，K主要取决于固定相性质； 每个组份在各种固定相上的分配系数K不同； 选择适宜的固定相可改善分离效果； 试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； 某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。 6.分配比 （partion radio）k 在实际工作中，也常用分配比来表征色谱分配平衡过程。分配比是指，在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的质量比： 1. 分配系数与分配比都是与组分及固定相的热力学性质有关的常数，随分离柱温度、柱压的改变而变化。 2.分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数，数值越大，该组分的保留时间越长。 3. 分配比可以由实验测得。 色谱流出曲线上的信息 1 根据色谱峰的个数，可判断样品所含的最少组份数。 2 根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析。 3 根据色谱峰的面积或峰高, 可以进行定量分析。 4 色谱峰的保留值及其区域宽度是评价色谱柱分离效能的依据。 5 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相(或流动相)选择是否合适的依据。 三、色谱分析的基本原理 ? 组分保留时间为何不同？ ? 色谱峰为何变宽？ 1.塔板理论－柱分离效能指标 塔板理论假设如下： （1）在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡。这一小段柱长度H称为理论塔板高度H。 （2）以气相色谱为例，载气进入色谱柱不是连续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（ΔVm）。 （3）所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且试样沿纵向扩散可忽略。 （4）分配系数在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板上的量无关。 理论塔板数 理 论 塔 板 高 度 色谱柱长度 柱效能指标 当色谱柱长度一定时，塔板数n 越大(塔板高度H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能越高，所得色谱峰越窄。 ? 不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 理论塔板数 有效板高 有效塔板数 2. 速率理论－影响柱效的因素 流动相 线速度 范弟姆特方程 （1）涡流扩散项A 固定相颗粒越小，填充越均匀 A 越小，H 越小，柱效越高，色谱峰越窄。 （2）分子扩散项B/u(纵向扩散项) 流动相 柱内谱带构型 相应的响应信号 产生原因：浓度梯度 影响因素：流动相流速； 扩散系数 （3）