2012届高三生物一轮复习课件：第三课_生物化学与分子生物学技术实践（苏教版选修1）.pptVIP

金太阳新课标资源网 第三课　生物化学与分子生物学技术实践 1．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是(　　) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动 【解析】　 带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移动。 【答案】　D 2．实验流程 (1)选鸡血做实验材料的原因 鸡血经济且易制得，鸡血红细胞、白细胞都具有细胞核，含大量DNA。哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，DNA含量较低，因而不宜做实验材料。 (2)实验中三次加入NaCl溶液 ①在步聚2中，加入NaCl溶液后必须充分搅拌，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中。 ②在步骤5中，加NaCl溶液的目的是使DNA再溶解，这时溶液中蛋白质含量已很少。 ③在步骤8中，加NaCl溶液的浓度比前两次低得多，但目的还是溶解DNA。 2．(2011·岳阳模拟)DNA的粗提取与鉴定的实验(如图)： (1)本实验材料选用鸡血细胞液，而不是鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中________含量较高。 (2)图A所示加入蒸馏水的目的是_________________。 (3)通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2 mol/L NaCl溶液的目的是_______________________。 (4)图C所示加入蒸馏水的目的是_______________。 (5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用__________试剂进行检测，在沸水浴条件下，可以看到颜色反应为________色。 【解析】　此题考查DNA的粗提取与鉴定实验材料及试剂的作用。(1)鸡血细胞没有细胞壁，而且细胞内DNA的含量较高。(2)如图A所示，鸡血细胞液中加入蒸馏水后，细胞内渗透压较高，则鸡血细胞吸水而涨破。(3)如图所示，溶液中加入2 mol/L NaCl溶液，DNA溶解而杂质析出。(4)如图C所示，加入蒸馏水后，溶液浓度会降低，当浓度降至0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低而析出。(5)在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。 【答案】　(1)DNA (2)使血细胞吸水涨破，释放出核物质DNA (3)使DNA溶解于NaCl溶液中 (4)使DNA的溶解度下降而析出 (5)二苯胺　蓝 高温 体内温和条件 温度 DNA或RNA RNA 引物 TaqDNA聚合酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 酶 80℃～100℃高温解旋，双链分开 在解旋酶作用下边解旋边复制 解旋 PCR 细胞内DNA复制 不同点 2.PCR的反应过程 一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。 3．PCR技术在反应过程中控制不同温度的意义 (1)90℃以上时变性，双链DNA解聚为单链； (2)50℃左右时复性，两种引物与两条单链DNA结合； (3)72℃左右时延伸，TaqDNA聚合酶促使DNA新链的合成。 3．(2010·徐州质检) 近十年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。 (1)加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________。 (2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNA分子，此过程中原料是________，遵循的原则是________。 (3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外， 至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的____________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠______________来维持。 【解析】　本题考查体内DNA复制与PCR技术的原理以及基本条件。 (1)PCR技术利用热变性原理使DNA双链间的氢键断裂，称为变性。 (2)PCR技术扩增DNA与细胞内DNA复制所需原料一样，为腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则。引物与模板的3′端结合后，DNA聚合酶才发挥作用。 (3)PCR技术与体内DNA复制不完全相同，除了需要模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要液体环境、适宜的温度和酸碱度，适宜的温度靠PCR仪自动调控，而酸碱度靠缓冲液来维持。 【答案】　(1)氢　变性 (2)3′　四种脱氧核苷酸　碱基互补