正交设计法优选穿山龙总皂苷提取工艺.docVIP

正交设计法优选穿山龙总皂苷提取工艺 　　【摘要】目的:确定穿山龙的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计进行条件优选,通过分光光度法对提取物进行总皂苷含量的测定。结果:优选提取工艺为:穿山龙饮片,加50%乙醇提取,提取次数为三次,每次提取时间为1.5h。结论:优选出的提取工艺较稳定,重现性好,可为生产实践提供理论依据。 　　【关键词】穿山龙;总皂苷;提取工艺;正交试验 　　 　　doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.05.240文章编号:1006-1959(2010)-05-1247-02 　　【Abstract】Objective:To determine the best extract craft of Dioscorea nipponica.Methods:Orthogonal experiment was used to optimize the condition,the content of con-saponin was determined by spectrophotometric method.Results:The optimized extract craft was:crude drug of Dioscorea nipponica was extracted by 50% alcohol for three times,each time for 1 hour.Conclusions:The optimized extract craft was stable with good reproducibility,which could do a lot for production from the theoretical point. 　　【Key words】Dioscorea nipponica;Con-saponin;Extraction craft;Orthogonal experiment 　　 　　穿山龙为2010版《药典》收录药材,为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)的干燥根茎[1],气微,味苦涩,性温。具有祛风止痛,舒筋活血,止咳化痰的功效。临床上用于风湿痛,风湿关节痛,筋骨麻木,大骨节病,跌打损伤,咳嗽喘息、气管炎等疾病的治疗[2]。现代药理研究证明,其总皂苷类成分具有调节免疫,改善心血管功能,祛痰,抗肿瘤,抗炎镇痛等多种药理作用[3]。因而确定提取总皂苷的合理化工艺能为工业化生产该类药物提供技术支持。本文用正交试验方法对其提取工艺进行优化,确定其最佳工艺参数。 　　1.仪器与试药 　　1.1 仪器:分光光度计(上海光谱仪器有限公司)、电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)、旋涡混合器(上海琪特分析仪器有限公司)、KQ-50B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 　　1.2 试药:穿山龙药材,购于哈市人民同泰药店,经鉴定为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的根茎、原薯蓣皂苷购于中国药品生物制品检定所(批号1539-200601)、其他试剂均为分析纯。 　　2.方法与结果 　　2.1 标准曲线的制备。 　　2.1.1 对照品溶液的配制。精密称取原薯蓣皂苷6.2mg,置10ml容量瓶中,加75%乙醇至刻度,超声30min,摇匀备用。 　　2.1.2 供试品溶液的配制。取0.0110g的药材提取物干粉,精密称定,置50ml量瓶中加,75%乙醇至刻度,超声30min,摇匀备用。 　　2.1.3 测定条件的选择。分别精密吸取供试品溶液0.2ml和对照品溶液0.5ml,置10ml具筛试管中,挥尽溶剂,分别精密加入高氯酸5ml,于65℃水浴中加热15min后,冰水冷却,在210-700nm处进行全波长扫描,结果在407nm处有最大吸收。 　　2.1.4 标准曲线的制备。分别取0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml对照品溶液,于10ml具塞锥形瓶中,挥尽溶剂,分别精密加入5ml高氯酸,置旋涡混合器振摇5min,65℃水浴中加热15min后,冰水冷却,407nm处测定吸光度,绘制标准曲线,曲线方程为y=0.249x+0.0033,r=0.9995,说明总皂苷在0.062-0.372mg有良好的线性关系。 　　2.1.5 稳定性试验。取样品溶液以上方法显色处理后,在不同时间每隔10min测定其吸光度值,结果表明样品在2h内是稳定的。 　　2.2 提取工艺优选。 　　2.2.1 因素水平的选择。采用L9(34)正交试验设计,用加热回流法确定出其最佳提取工艺。设计方法如(表1所示): 　　表