仪器及药物分析（3-3荧光、质谱）.ppt

第二节 光学分析 一、原子吸收光谱 二、紫外 – 可见分光光度法 三、红外分光光度法 四、近红外光谱法（自学） 五、荧光分光光度法 六、有机质谱法 七、旋光与折光分析法(自学) 五、荧光分子光度法 （一）基本原理 （二）荧光分光光度计 （三）特点、方法与应用 （一）基本原理 当物质分子吸收了一定波长的紫外光能之后，基态 电子跃迁到第一激发态，处于激发态的电子首先以 无辐射的方式下降到第一激发态的低能级，而后再 回到基态时，所发射出的光称为荧光。 荧光是一种以光能为激发源的发射光，且波长比激 发态波长更长，所以，利用物质的荧光现象而建立 的分析方法称为荧光分光光度法。 荧光定量分析原理 荧光是由物质在吸收光能之后产生的发射光，其荧光强度 与物质吸收光能的程度和产生荧光的物质有关。 荧光效率φ ——反映荧光强度的重要参数 荧光强度 If 应与荧光物质的吸光强度( I0 －I )和荧光效率φ成正比，即 If =φ ( I0 －I ) 根据朗伯 – 比尔定律，和有关的运算，在一定的条件下， 得： If = 2.3φ I0εcl = Kc 灵敏度高：比紫外-可见分光光度法高2～4个数量级； 检测下限：0.1～0.1 μg/cm-3 相对灵敏度：0.05-0.005ppb（0.05M