苏、鲁、川地区禽坦布苏病毒病的流行情况调查及三重抗体ELISA方法的建立.pdf

硕士论文：苏、鲁、川地区禽坦布苏病毒病的流行情况调查及三重抗体ELISA方法的建立 3．1江苏及四川样品ELISA检测结果……………………………………………………．．13 3．2不同采样时间的鸭坦布苏病毒抗体效价变化…………………………………………14 3．3不同品种鸭抗体阳性率结果……………………………………………………………14 4讨论……………………………………………………………………………………………………………………………．15 第三章鸡坦布苏病毒病流行情况调查………………………………………………………………19 l材料……………………………………………………………………………………………………………………………．19 1．1重组E蛋白、阴阳性血清、阴阳性卵黄抗体…………………………………………19 1．2主要试剂…………………………………………………………………………………l9 1．3主要实验仪器……………………………………………………………………………20 2方法……………………………………………………………………………………………………………………………．20 2．1样品采集与处理…………………………………………………………………………20 2．2间接ELISA………………………………………………………………………………………………………．．20 2．3套式RT-PCR检测………………………………………………………………………．21 3结果……………………………………………………………………………………………………………………………．22 3。l江苏不同地区ELISA检测结果………………………………………………………一22 3．2不同品种鸡抗体阳性率结果……………………………………………………………23 3．3套式RT-PCR检测结果…………………………………………………………………23 4讨论……………………………………………………………………………………………………………………………．：14 第四章鹅坦布苏病毒病流行情况调查………………………………………………………………27 1材料……………………………………………………………………………………………………………………………．27 1．1主要试剂及菌种…………………………………………………………………………27 1．2主要实验仪器…………………．………………………………………………………．．27 2方法……………………………………………………………………………………………………………………………．28 2．1流行病学调查……………………………………………………………………………28 2．2样品采集与处理…………………………………………………………………………28 2．3间接ELISA检测……………………………………………………………………………………．29 2．4套式RT-PCR检测………………………………………………………………………29 2．5PCR阳性产物鉴定及回收………………………………………………………………29 2．6胶回收产物与T载体的连接……………………………………………………………29 2．7DH50t感受态细胞的制备………………………………………………………………．．30 2．8连接产物的转化…………………………………………………………………………30 2．9重组质粒的提取…………………………………………………………………………31 1 2．10重组质粒的鉴定………………………………………………………………………．3 目 录 2．11NS5基因的序列测定与分析…………………………………………………………。32 3结果……………………………………………………………………………………………．．32 3．1发病情况调查及剖检病变观察结果……………………………………………………32