12、制剂的基本生产技术-病毒增殖技术.pptVIP

第九讲 病毒增殖技术 一、病毒的复制、增殖与营养 吸附：非特异性静电－特异性受体 影响因素：温度、阴、阳离子 侵入：病毒直接进入胞浆； 细胞吞饮病毒； 病毒囊膜与细胞融合 脱壳 生物合成：细胞浆或细胞核中完成 早期：合成酶类、核苷酸原料 晚期：合成病毒结构蛋白 装配：细胞浆或细胞核中完成 核酸、蛋白质盘曲浓缩＋多肽－包壳＋ 细胞膜的脂质、糖类和病毒蛋白－病毒颗粒 释放：细胞通道溢出； 细胞死亡自溶释出； 细胞膜出芽； 细胞膨胀破裂放出 二、动物增殖病毒技术 动物的选择： 接种方法 4 静脉接种：大小鼠的尾静脉；兔耳缘静脉；犬、豚鼠前肢皮下静脉或后肢小隐静脉；灵长类可用股静脉、隐静脉、前肢皮下头静脉；山羊颈静脉，小型猪耳静脉、颈静脉或前大静脉，鸡翼下静脉，犬舌下小静脉 5 腹腔接种 6 脑内接种 三、禽胚增殖病毒技术 禽胚的选择 （一）禽胚接种途径与收获 绒毛尿囊膜接种法 多用于嗜皮肤性病毒的增殖：痘病毒、新城疫和疱疹病毒 1 选择10～13日龄的鸡胚，划出气室和胚位 2 消毒后在气室部位钻一小孔，在鸡胚面避开血管钻一小孔，勿穿透绒毛尿囊膜 3 用橡胶吸球紧贴气室孔轻轻一吸，使鸡胚面小孔处的绒毛膜下陷造成人工气室 4 在人工气室孔注入0.1～0.2ml病毒液，轻摇鸡蛋使病毒液均