水分胁迫条件下复水对糜子叶片衰老与活性氧代谢的影响.docVIP

水分胁迫条件下复水对糜子叶片衰老与活性氧代谢的影响 　　糜子(Panicum miliaceum L.)是中国北方旱作农区重要的粮食作物和经济作物[1],年播种面积约70~80万hm2,主要分布在陕西、山西、甘肃、宁夏和内蒙古等长城沿线风沙区,干旱是影响其产量的主要因素之一.因此,研究糜子抗旱的生态生理机制,提高糜子产量和品质,增加产区农民收入,维护国家粮食区域平衡具有重要的战略意义[2].大量研究表明,水分胁迫在减少水分消耗的同时,必然对作物生育造成影响和伤害[3-4],但复水对适度水分胁迫下作物的生长发育、生理生化性状有一定的调节效应[5-7].山仑等[8]研究发现,作物对水分胁迫的响应有一个从”伤害”到”适应”的过程,一定范围的水分胁迫后复水,往往会产生生长、生理和产量上的补偿.在细胞水平上,长时期干旱逆境会使植物细胞结构和功能受到破坏,植物体内自由基的大量积累会引发膜脂过氧化作用,最终分解的产物丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量也会增加,破坏细胞膜,加大膜脂透性[9].作物在受到水分胁迫后复水,可通过多种途径产生活性氧,同时细胞内也存在清除这些活性氧的多种途径[10-11],其中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)等是活性氧清除系统的重要保护性酶[12-13],它们能有效地阻止高浓度氧积累,防止膜脂过氧化,延缓植物衰老,使植物维持正常的生长和发育[14].目前关于糜子的研究多集中在糜子种质资源、营养价值、高产栽培模式等方面[15],有关复水对糜子叶片衰老与活性氧代谢的系统研究鲜见报道.本研究采取盆栽试验方法,研究水分胁迫条件下复水对糜子叶片衰老与活性氧代谢的影响,旨在为建立糜子抗旱节水 栽 培技术 体 系 提 供 理 论依据. 　　1材料与方法 　　1.1试验材料及设计 　　糜子盆栽试验于2013年6-9月在西北农林科技大学干旱棚进行(北纬34°16′,东经108°4′).盆土采用耕层0~20cm土壤,土壤类型为垆土,养分含量为有机质10.4g/kg、全氮0.12g/kg、碱解氮39.2mg/kg、速效磷0.45mg/kg、速效钾6.8mg/kg,风干土土壤含水量为2.8%,田间最大持水量为26.20%.试验用高35cm、内径30cm的聚乙烯塑料桶,先于盆底装入2.50kg的石子,再铺2.00kg的细砂作为过滤层,斜插入1根直径2.0cm、长40cm的PVC管用于灌水和通气,管的下方位于盆的中心,上方靠在盆沿.土壤经风干、打碎、过筛后,与基肥混合充分后每盆装干土12kg.基肥用量为每千克干土施P2O50.2g、N素0.25g的标准,每盆施尿素6.0g,磷酸二氢钾4g.供试品种为榆糜2号,每 盆 播 种30粒,三 叶 一 心 期 间 定 苗,每 盆12株. 　　播种到三叶一心期前保持充分供水,三叶一心期开始进行水分胁迫,使各处理土壤相对含水量分别达到设定指标上限,胁迫历时到拔节期、开花期后,当日即复水至充分供水(即对照)水平.共设置7个处理(表1),每个处理重复15盆,共105盆.各盆随机摆放,每10d随机调换一次位置,排除边际效应.每天早晨用感量2g的TCS-A1-30型计重台秤称质量,低于控水下限补水. 　　1.2测定项目及方法 　　选择生长基本一致,无病虫害的糜子主茎挂牌标记,从抽穗期开始直至成熟,每隔6d取样一次. 　　取样以糜子旗叶、倒二叶和倒三叶作为测定对象,所取样品及时放于冰壶中带回实验室,洗净叶片表面的尘土和污物并用吸水纸擦干,去除叶脉,混匀后进行各项指标的测定,重复3次. 　　1.2.1叶绿素含量 　　准确称取0.08g旗叶、倒二叶和倒三叶剪碎的样品,分别置20mL具塞刻度试管中,加入80%丙酮浸 提 叶 绿 素[16].用Inskeep[17]法 计 算 叶 绿 素含量. 　　1.2.2酶液制取及保护酶活性测定 　　糜子叶片,去除中脉 后剪碎,分别 取0.50g旗叶、倒二叶和倒三叶的剪碎的 样品,置 于预 冷的研钵中,加入8mL冷磷酸缓冲液(pH 7.8)及少量石 英 砂,在 冰 浴 中 研 磨 提 取,匀 浆 于2 ℃,20 000r/min冷冻离心20min,上清液即为酶提取液,于4 ℃冰箱中保存备用.参照Giannopolitis等[18]和王爱国等[19]改进法测定超氧化物歧化酶(SOD)活 性;过 氧 化 物 酶 (POD)活 性 测 定 采 用Sigma法[20]. 　　1.2.3丙二醛(MDA)及可溶性蛋白质含量测定 　　采用Heath等[21]的硫代巴比妥酸法测定丙二醛;考马斯亮蓝G-250蛋白染色法测定可溶性蛋白质含量[16]. 　　1.2.4产量及其构成因素 　　成熟期随机取5株分析籽粒产量构成