128株多重耐药的铜绿假单胞菌的药敏试验分析.pptVIP

128株多重耐药的铜绿假单胞菌的药敏试验分析 川北医学院检验系 黄义山 序言 众所周知，医院感染日趋严重，MRS、ESBL、AmpC、VRE、等往往是各大医院微生物科最常见的耐药菌。 多重耐药的铜绿假单胞菌（PA），不动杆菌等已经成为ICU呼吸道感染的重要菌种，对碳青酶烯类抗生素耐药率越来越高。 多重耐药的铜绿假单胞菌（PA）的耐药机制较复杂，主要有产各种酶如ESBL、 AmpC等，膜的孔道蛋白消失，靶位的改变 ，泵出机制等。 摘要 目的：分析我院临床标本中分离多重耐药铜绿假单胞细菌的药敏试验结果和其对不同等级抗生素耐药趋势，为临床经验用药提供实验室依据 。同时为今后的进一步研究提供依据。 方法：1．细菌分离鉴定；用常规方法分离细菌；用Ｖitek-32细菌鉴定仪鉴定细菌．２．药敏试验：先用常规Ｖitek-32细菌鉴定仪筛选多重耐药铜绿假单胞细菌，然后用扩散法（K-B法）检测各种常用抗生素对细菌的耐药抑菌圈．将其直径输入whonet.5软件统计 。 结果：多重耐药铜绿假单胞细菌耐药率最高的是头胞塞肟（CTX），头胞曲松（CRO），多重耐药铜绿假单胞细菌耐药率最低的是泰能(IPM), 其中泰能(IPM) 耐药安曲南敏感构成比为18/42.多重耐药现象严重。讨论: 多重耐药铜绿假单胞细菌的耐药机制十分复杂，从本文其耐药表型可见一些常见耐药机制如ESBL，AMPC，金属酶[1]，膜通道改变的都可能存在，因此，应加强多重耐药铜绿假单胞细菌对常用抗生素的耐药性检查，临床应根据药敏试验结果用药,尽量减少临床经验用药,避免盲目用药. 关键词 多重耐药 铜绿假单胞细菌 金属酶 材料和方法 1.????? 1.1材料 1.1.1仪器:是法国生物梅里埃的VITEK-32全自动细菌鉴定仪, 统计分析软件为WHO提供whonet.5统计分析软件. 1.1.2 试剂:M-H琼脂(美国BD公司),GNI，NFC，GNS细菌鉴定卡和药敏试验(法国生物梅里埃公司). 1.????? 1.3质控细菌:大肠埃烯菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,铜绿假单胞菌ATCC27853(我室保存).1.1.4标本：痰，脓，血，尿，分泌物，精液等。1.1.5 标本分布：ICU，呼吸内科， 心内科 ，普外科 ，泌尿外科，门诊系统等。1.2方法1.2.1 细菌鉴定：用常规方法分离培养细菌，用VITEK-32全自动细菌鉴定仪，NFC和GNI鉴定卡鉴定细菌，用GNS药敏试验卡作常规药敏试验。1.2.2将两类以上药物耐药的多重耐药铜绿假单胞细菌用纸片扩散法（K-B法）药敏实验。测定抗生素的抑菌圈直径。1.2.3 将细菌名和抗生素的抑菌圈直径输入whonet.5统计分析软件，根据NCCLS规则统计分析结果。1.2.4配对比较分析胺曲南(ATM) 头孢他啶(CAZ) 泰能(IPM) 的耐药性，探索其可能存在的耐药机制。 结果 泰能(IPM)与 胺曲南(ATM)的药敏试验结果有较显著性差异(P0.5)。 头孢他啶(CAZ)与 胺曲南(ATM)的药敏试验结果没有较显著性差异(P0.5)。 讨论1 128株多重耐药铜绿假单胞细菌对泰能敏感率为64%，因此它是作为治疗多重耐药铜绿假单胞细菌感染降阶梯治疗的首选生素。其次是头孢他啶(CAZ)敏感率是58%，它也可作为治疗多重耐药铜绿假单胞菌抗生素。但是这两类药作为临床抗感染治疗首选药，应考滤多重耐药铜绿假单胞细菌的多重耐药性。如产酶株应确认属于那类酶，如产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）、AmpC酶，金属酶等，或是膜通道蛋白的消失，或是多种耐药机制都存在这些耐药表型微生物室应加强监测力度，为临床合理治疗多重耐药的铜绿假单胞菌提供实验室依据。 讨论2 多重耐药的铜绿假单胞菌对三代头孢菌素头孢噻肟(CTX) 头胞曲松（CRO）几乎不敏感可能是与多重耐药的铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）有关，另外部分多重耐药的铜绿假单胞菌对头胞媲美（FEP）敏感，这些菌株与产AmpC酶有关。值得注意的是铜绿假单胞菌对泰能(IPM)耐药，大约有两种常见表型，一种是产金属酶对除胺曲南(ATM)以外的所有β-内酰胺类抗生素都耐药，治疗这类菌感染可选用胺曲南(ATM) [4]，另一种是膜通道蛋白的消失，这中菌株应做一些不常用抗生素如多粘菌素、氯霉素等的药敏试验供临床参考，此外亚胺培南耐药株可能对美洛培能敏感。因此，有条件的实验室应开展ESBLS，AmpC酶的确诊试验。同时应注意金属酶的检测。 讨论3 多数多重耐药的铜绿假单胞菌是医院ICU病房所分离的，说明其为ICU常见感染菌，由于耐药机制复杂，表型更是多样性的，没有一定的规律，导致临床病房治疗该菌引起的感染的失败，特别是ICU病房降阶梯治疗的失败，