壳聚糖固定化β-半乳糖苷酶的研讨.pdfVIP

摘要 摘 要 以三氯均三嗪为交联剂，实现了p．半乳糖苷酶在壳聚糖载体上的固定化过程，并与 传统交联剂戊二醛进行了比较。在最优化制备条件下，测定了固定化酶的活性回收率为 47％。另外，以三氯均三嗪作为交联剂制备固定化B．半乳糖苷酶，反应条件较戊二醛法 温和，操作简单，耗时短。 ’ 子量对固定化酶活力、酶活性回收率的影响，确定了50x104的壳聚糖为最适固定化B． 半乳糖苷酶载体。自设计方法制备了毫米级壳聚糖小球，方法较传统方法更加简单、快 速。湿润壳聚糖小球直接干燥和采用体积分数为30％的甘油处理后干燥对比实验表明， 后者能够保持小球湿态时的结构，既保证了酶的固定化效果，又有利于载体的工业储存。 以硅胶为致孔剂制备了多孔壳聚糖载体，扫描电子显微镜显示，添加致孔剂的载体 表面(载体I)比未加致孔剂的载体表面(载体II)具有更多的孔结构。上述两种载体 分别固定米曲霉B．半乳糖苷酶，固定化结果表明：载体I制备的固定化酶具有更好的酶 活性和酶活性回收率。最后我们对固定化酶的性质：最适pH，pH稳定性，最适温度， 热稳定性，操作稳定性以及动力学参数等进行了测定，结果表明：以硅胶为致孔剂制备 的固定化酶各项数据良好，具有更广的应用前景。 关键词 壳聚糖小球p一半乳糖苷酶 固定化硅胶戊二醛三氯均三嗪 Abstract Abstract wasimmobilizedon with chitosan 13-galactosidase microsphere azineaS that ascrosslinker．After crosslinker,and glutaraldehyde compared、^哇thusing getting the were thebestconditionsof factors discussedtodeterminethefinest cartier,variOUS immobilizationconditions．The determinedwas47％atthe enzymeactivityrecovery optimal condition．Theresultsobtainedshowedthattheimmobilizationwas and simpleefficient．So， Wasakindof crosslinkertoimmobilize 2，4，6一trichloro-1，3，5-triazinegood enzyme． withdifferent used Chitosan molecular as weight(50x104，100×104，200x104)Was materialtoimmobilize resultsobtainedshowedthat50x104chitosanWas IB-galactosidase，the themostsuitabletoimmobilze beca