第12章--发酵机械及设备
第四步:配料 增容: 实消过程中部分蒸汽会冷凝形成冷凝水进入 培养基中,从而导致培养基体积变大,变大的部分 即为增容。不同的地区,不同的气候,增容量都会 不同的,需要通过多次实消灭菌总结才能得到一个 经验值。 配料操作流程: 第五步:实消 发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处 理, 利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、 真菌蛋白质凝固而死亡。实消结束以后罐内是无菌 的环境,需通入无菌空气进行保压直到培养结束。 实消操作流程 第六步:接种 接种方法:压差接种法 接种材料:种子液、火焰圈、95%酒精、酒精棉、镊子、打火机、石棉手套 注意事项: 环境:关闭车间门窗和排气扇,接种环境周围禁止人员来回走动,降低空气流动性; 无菌:拔接种针护套时需靠在火焰附近,接种壶不可倾斜过度,避免种子液流出;接种操作过程中罐压不能掉零; 安全:拔出接种壶时接种针不可以指向人员,避免接种针飞出后造成人员受伤;点燃火焰圈不可随处乱扔,熄灭以后才可以继续操作。 接种操作: 准备 准备好接种所需材料 关闭门窗、排气扇 操作人员合理分工,一个为主操作,一个为副操作 消毒 副操作用酒精棉擦拭接种口进行消毒 消毒以后用火焰圈保护好接种口 接种 主操作在火焰掩护下拔掉接种针护套,快速插入接种口,双手摁住接种壶 副操作调节罐内压力慢慢升到0.15MPa,然后快速降到0.05MPa,进行接种 消毒 接种完以后主操作快速拔出接种壶 副操作用酒精棉擦拭接种口消毒以后迅速盖上接种盖,设置好参数后进行培养 第七步:培养 工艺控制与记录 每间隔1小时记录一次参数; 主要参数有PH值、溶氧值、温度、发酵罐压力和过滤器压力。 取样 依据工艺要求按时取样送交化验部并做好镜检工作。 设备巡查 检查搅拌电机,看电机有没有异响、过热等; 检查酸碱罐、消泡罐和补料罐装液量,及时补充; 检查管道、阀门,看有无外漏。 第八步:放罐 菌体生长情况符合下罐条件以后即可放罐,放 罐操作流程如下: 提前1小时通知后提取车间准备放罐 取样 蒸汽吹洗放罐管道 检查 升压 放罐 填写记录表格 第九步:洗罐 放罐结束以后立即进行洗罐,洗罐流程如下: 卸压:打开罐盖前要先卸掉罐压; 电极保养:拔出电极清洗干净以后进行正确保养; PH电极用3摩尔每升的KCl溶液浸泡电极头; 溶氧电极直接通电。 冲洗罐壁:用高压水枪冲洗罐壁,如果罐壁培养基冲洗不掉则考虑碱煮(10%的碱液用夹套升温到90℃以后保温30分钟); 排污:排掉污水。 第十步:检修 目的:确保阀门、法兰、机械密封和试镜灯等不会泄漏,以备下批生产使用; 方法:罐体通入空气保压在0.15MPa,然后用肥皂水进行试漏,出现泄漏的阀门待压力卸掉以后进行检修,更换相应的垫片。 * * * * 发酵罐的操作就这十步内容,做好这十步就能做好每一批发酵 * * 算是上罐的准备工作,如果发现了问题就要尽快解决,更换阀门或者更换垫片 等 * * * * 使用电极是为了更好的监测菌体的生长情况,但是这种检测仪器使用一次以后都会出现偏差,所以使用前都要进行标定下,构建新的直线, * * 本车间增容5%,上罐7000L,种子液500L,培养基6500L,扣掉增容325L,定容到6175L,20L罐增容比例会更多,10%-20% * * 原始种子液、一级扩大培养、(二级扩大培养)、发酵 * * * * * (一)发酵罐结构尺寸的确定 (二) 罐数的确定 (三) 发酵罐冷却面积计算 三 酒精发酵罐的计算 四 代谢终产物抑制消除方法 消除或减轻代谢终产物的抑制是提高生产效率的关键因素。对于酒精发酵来说:酒精浓度大于2%时,即表现出抑制作用;酒精浓度大于8%时,酵母的繁殖就停止了。要保持发酵的快速进行,通常认为反应器内酒精浓度控制在3%以内,这就要求不断地分离移去酒精。 消除方法有:真空发酵、萃取发酵、膜蒸发发酵、二氧化碳气提发酵等。 1、真空发酵: 原理:发酵过程中保持一定的真空度,发酵液处于沸腾状态,酒精被蒸馏出来。 主要设备有发酵罐、发酵蒸发器、总凝器、分凝器、收集器、真空泵。 优点:糖浓度提高3倍,发酵时间缩短1/3;酒糟、水、蒸汽都有减少;生产能力、设备利用率提高;酒精浓度可达33%。 缺点:能耗大、设备真空操作负荷大、操作费用高、负压操作容易引起杂菌污染。 2、萃取发酵: 具有能耗低、操作简便易行的优点。发酵和萃取在同一反应器中进行:采用固定化细胞技术,选择合适无毒的萃取剂。 发酵和萃取分开进行: (1)膜萃取:将发酵液取出,以三聚磷酸丁酯为萃取相,在中空纤维膜反应器中萃取。 (2)二氧化碳超临界萃取:发酵液逆向通过超临界二氧化碳萃取柱,富含酒精的超临界流体通过活性炭柱吸附分离酒精。 3、吸附法 将
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