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病理检验技术 12级检验（1）班01号 学号：2012130801001 姓名：蔡枝奇 第六章 组织制片技术 第一节 组织块的处理 第二节 切片机具与切片 一、取材 一、切片机 二、固定和固定液 二、切片刀 三、洗涤、脱水、透明 三、磨刀与被刀 四、浸蜡、包埋 四、切片 学 习 目 标 1.了解常用组织切片的种类 2.熟悉组织切片制作的基本程序 3.掌握常用固定液的配置和应用 4.熟练进行洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、封片等操作 第一节 组织块的处理 一、取材 定义：按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块，用于制作组织切片的过程，称为取材 （一）取材的配合 病理检验技术员取材时的职责是：配合病理医师对病变组织进行肉眼检查，准确记录病理医生检查时描述的病理改变，按照病理检验的需要，选择和确定取材的部位和块数。病理检验技术人员要及时对切取的组织进行编号或标记，并在病理检单上做好记录，以便病理医生镜检时查对。取材后的标本应加足固定液，按编号存放，以备复查之用。 （二）注意事项 1.避免组织结构变形 切取组织的刀、剪应锋利，刀体宜薄，并有足够的长度。 2.组织块大小适当 通常切取的组织块厚约0.2~0.3cm，大小以1.0~1.5cm×1.0~1.5cm为宜。 3.及时取材 4.标明包埋方向 5.染色、包裹小标本 6.充分暴露病灶 取材应避免过多的坏死组织或凝血块 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材 10.认真核对 （二）固定方法 细胞的主要组成成分是蛋白质、脂类及糖类，应根据观察目的和诊断要求，选用相应的固定液和固定方法，使其凝固或沉淀。 常用的固定方法有以下几种： 1.浸泡固定法 2.注射、灌注固定法 3.微波固定法 4.蒸气固定法 （三）常用固定液 1.单纯固定液 是指有一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括：重铬酸钾、苦味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等。 常用的有： 甲醛（福尔马林）、乙醇、乙酸（冰醋酸、醋酸) 2.混合固定液 是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作上多用混合固定液，其固定效果明显优于单纯固定液。 （1）中性甲醇液 可作常规固定液或标本保存液，脂肪染色此液固定。 （2）乙醇-醋酸-甲醇液（AAF液） 其特点是固定快速，对脂质、糖类、蛋白质等物质有很好的固定作用，避免了三种固定液单独使用引起的组织收缩或膨胀，是一种优良的混合固定液。 （3）乙醇-甲醛液（AF液） 适用于皮下组织中肥大细胞的固定。 固定后的组织不必经低浓度逐级乙醇脱水，可直接移入95%乙醇脱水，也不用水洗，缩短了脱水时间。 配方： 95%或乙醇脱色 90mL 40%甲醛 10mL （4）Bouin液 是一种常规用于活检标本固定的良好固定液，适用于大多数组织的固定，尤其适用于结缔组织染色。 （5）Zenker液 适用于一般组织固定，胞核和胞质染色均清晰，对免疫球蛋白染色最好，也可用于病毒包涵体、某些肿瘤标本的固定。 （四）固定的注意事项 1.及时固定 取材后立即将组织块放入固定液中 2.固定容器宜大 3.固定液应足量 4.防止组织变形 5.确定恰当的固定时间 固定时间应依据组织块的大小、厚度以及固定液的种类、环境温度而定。组织块大小为（1.0~1.5cm）×1cm×（0.2~0.3cm）时，固定时间以12~24h为宜。 三、洗涤、脱水、透明 （一）洗涤 定义：用水或乙醇等将组织经过固定处理后，与组织结合的固定液及沉淀物清洗掉的过程，称为洗涤。 1.洗涤目的 除去未与组织结合的固定液及沉淀物。 2.洗涤的方法 （1）含水固定液的洗涤方法：常用的含水固定液是甲醇溶液，用自来水冲洗即可。 （2）含乙醇固定液的洗涤方法：一般不需要洗涤，如果需要洗涤，应使用与固定液中的乙醇浓度相近或略低的乙醇洗涤。 （3）特殊固定液的洗涤方法:略 （二）脱水 定义：将组织内的水分用某些化学试剂置换出来的过程称为脱水。 1.脱水的目的 组织块经固定和洗涤后，含有大量的水分，而水与苯、二甲苯等透明剂不混溶，故组织在透明前必须用能与透明剂相混溶的脱水剂（如乙醇），把组织内的水分置换出来，为下一步的透明做准备。 2.常用的脱水剂 脱水剂能同时以任何比例雨水和头，透明剂混合。常用的有：乙醇、正丁醇、丙酮等，其中乙醇最常用。 3.脱水的方法 一般把脱水剂配成各种浓度，