第五章-发酵工程灭菌和空气除菌-董媛.ppt

丝网分离器原理： ?0.1-0.4mm 利用填料的惯性碰撞和拦截作用，将空气中的水雾和油雾分离出来。填料的成分有活性炭、瓷环、金属丝网、塑料丝网等，分离效率随表面积增大而增大。 内部填料可拆换或清洗，使用寿命长。对1μm以上的雾滴除去率98%。 如何提高 过滤除菌 效率 设计合理 预处理设备 选择合适 净化流程 保证进口 空气的洁 净度。 降低空气 相对湿度 保证过滤 介质干燥 合理空气 过滤器， 除菌效率 高的过滤 介质 增湿方法 1.往空气中通入直接蒸汽（此法通常不能单独使用）； 2.喷水（是应用最普遍的方法）； 3.空气混合增湿； 空气的增湿和减湿方法 减湿方法 1.喷淋低于该空气露点温度的冷水； 2.使用热交换器把空气冷却至其露点以下； 3.空气经压缩后冷却至初温，使空气减湿； 4.用吸收或吸附法除掉水气，使空气减湿； 5.通入干燥空气。 例1：有一发酵罐内装40m3培养基，在1210C温度下实罐灭菌，原污染程度为每1ml有2×105个耐热细菌芽孢，已知1210C时灭菌速度常数k=1.8min-1，求灭菌失败机率为0.001时所需时间。 解：N0=40×106×2×105=8×1012(个) Nt=0.001(个) k=1.8(min-1) ㏑(Nt/N0)=-kt t=2.303/k[lg(N0/Nt)]=2.303/1.8[lg(8×1015)] =20.34(min) 由于升温阶段就有部分菌被杀灭，特别是当培 养基加热至1000C以上，这个作用较为显著， 故实际保温阶段时间比计算值要短。 例2．某发酵罐内装40m3培养基，采用连续灭菌，灭菌温度为1310C，原污染程度为每1ml含有2×105个杂菌，已知1310C时灭菌速度常数为15min-1，求灭菌所需的维持时间。 解：N0=2×105(个/ml) Nt=0.001/(40×106)=2.5×10-11(个/ml) t=2.303/k[lg(N0/Nt)]=2.303/15×lg[(2×105)/(2.5×10-11)] =2.37 min 就像养生，我们知道吃什么，如何锻炼身体是最有益的，是因为我们知道哪种食物，药物是通过什么途径发挥作用的。而我们的教材呢，以发酵产物为划分依据，分别介绍一下微生物的发酵机理。 * 实验室内哪些操作属于灭菌，哪些属于消毒呢？培养基的灭菌及接种前接种针的灭菌,超净台内无菌操作前手的消毒 * 试举例几种常用化学消毒剂浓度及使用范围？医用酒精70-75%,甲醛空气消毒1-2% 在灭菌过程中，活菌数逐渐减少，其减少量随残存活菌数的减少而递减， 生物受热后随时间而逐渐死亡是按一级化学反应动力学规律进行的。 温度和时间的关系可用对数残留定律确定。 一级反应： 用N表示残留活菌个数，则活菌的减少率（死亡率），与N呈线性关系。 K是表达微生物耐热性的特征常数 ，单位是min-1，与微生物的种类和灭菌温度有关。K越小，微生物越耐热。死亡速率常数K（热致死反应速率常数） 空气流量：VVM：单位时间（min）单位发酵液体积（m3）内通入的标准状态下的空气体积（m3），一般在0.1-2.0。 抗生素等多数品种发酵，耗氧量大，无菌程度要求十分严格，所以空气必须经过严格的无菌处理后才能通入发酵罐内，以确保生产在纯种培养状态下进行。 空罐灭菌 空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，为空罐灭菌。 为了杀死所有微生物特别是耐热的的芽孢，空罐灭菌要求温度较高，灭菌时间较长，只有这样才能杀死设备中各死角残存的杂菌或芽孢。 2.3发酵设备的灭菌 ※※第三节 空气的除菌 分布规律： 微生物在空气中的分布情况与空气环境因素有关，空气质量愈好，微生物的种类及数量愈低。发酵工厂通常采用高空采气的方法。 二、发酵用无菌空气的概念和质量标准 为确保生产在纯种培养状态下进行，严格无菌条件下发酵用无菌空气的质量标准要求如下： 连续提供，保持一定流量；保证发酵罐0.1-2.0 V/VM的需气量； 保持一定的压强；表压达到0.2~0.4 MPa。 空气的相对湿度在进入发酵罐之前≤70%。 进罐前的空气温度要比培养温度略高或相同。 洁净度达到N= 10-3 ； 三、空气净化的方法 热灭菌法 辐射灭菌法 静电除菌法 介质过滤除菌法 二、空气除菌的方法 二、空气除菌的方法 空气的过滤除菌 过滤 介质 绝对过滤 深度过滤 介质的空隙小于被拦截的微生物大小，如用聚四氟乙烯或纤维