细菌的染色和细菌细胞构造的观察PPT.pptVIP

细菌的染色和细菌细胞构造的观察 细菌的染色和细菌细胞构造的观察 目的要求 染色剂和染色的原理 实验材料 实验程序 思考题 目的要求 学习微生物涂片 掌握细菌的一般染色发和革兰氏染色 进一步熟练掌握显微镜油镜的使用技术 观察和识别细菌细胞的特殊构造 染色剂和染色原理Ⅰ 微生物染色的基本原理，是借助物理和化学因素的作用而进行的。物理因素如：细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。 化学因素如：正负离子之间的相互吸引等 染色剂 染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型： 1. 酸性染料：如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。 2. 碱性染料：一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等，细菌易被碱性染料染色。 3. 中性（复合）染料：如伊红、美兰等，Wright染料和Gimsa染料等（常用于细胞核染色）。 4. 单纯染色：这类染料的化学亲和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类（Sudan b)的染料。 染色剂和染色原理Ⅱ 微生物染色常用染料如下表： 实验程序Ⅰ （细菌染色的方法和步骤） 细菌染色的方法:　　　　　　　　　　　　　 １.单染色法：用一种染色液染菌体后，就可以观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。　　　　　　　　 ２.复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。常用的有：革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法、细胞染色法等。 染色技术的一般过程　　　　　　　　　　 涂片　　干燥　　固定　　染色　　媒染　　脱色　　复染　　水洗　　干燥　　镜检 实验程序Ⅱ （简单染色的方法和步骤） 简单染色法（一般染色法） １.菌种：牙垢细菌 ２.涂片 ３.干燥：自然气干或酒精灯高处微微加热。 ４ 固定 ５.染色：在整个涂面上滴加齐氏石炭酸复红，染色１分钟 。 ６.水洗：倾去染液，用自来水细流冲洗至流下的水中无染料颜色为止。 ７干燥：空气中自然干燥。８ 镜检：在油镜下观察牙垢中的各种细菌形态并绘图。 实验程序Ⅲ （革兰氏染色的方法和步骤） 革兰氏（Gram）染色法 1. 涂片 2. 初染：在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液，流水冲洗至无紫色。 3. 媒染：先用新配的路哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。 4. 脱色：除去残水后，滴加95%酒精进行脱色约30秒，后立即用流水冲洗。 5. 复染：滴加番红染色液，染1分钟，水洗后用吸水纸吸干。