医学课件细胞化学染色检验.ppt

实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）二、过碘酸-雪夫反应(PAS) 实验九：细胞化学染色检验（一）三、碱性磷酸酶染色（NAP） 实验九：细胞化学染色检验（一）三、碱性磷酸酶染色（NAP） 实验九：细胞化学染色检验（一）三、碱性磷酸酶染色（NAP） 实验九：细胞化学染色检验（一）三、碱性磷酸酶染色（NAP） 实验十：细胞化学染色检验（二）一、铁染色（Iron stain） 实验十：细胞化学染色检验（二）一、铁染色（Iron stain） 实验十：细胞化学染色检验（二）一、铁染色（Iron stain） 实验十：细胞化学染色检验（二）一、铁染色（Iron stain） 实验十：细胞化学染色检验（二）一、铁染色（Iron stain） 实验十：细胞化学染色检验（二）二、氯乙酸AS-D萘酚酯酶 （特异性酯酶）染色 实验十：细胞化学染色检验（二）二、氯乙酸AS-D萘酚酯酶 （特异性酯酶）染色 实验十：细胞化学染色检验（二）二、氯乙酸AS-D萘酚酯酶 （特异性酯酶）染色 实验十：细胞化学染色检验（二）二、氯乙酸AS-D萘酚酯酶 （特异性酯酶）染色 实验十：细胞化学染色检验（二）三、 α-丁酸萘酚酯酶染色 实验十：细胞化学染色检验（二）三、 α-丁酸萘酚酯酶染色 实验十：细胞化学染色检验（二）三、 α-丁酸萘酚酯酶染色 5.临床意义： 1）鉴别缺铁性贫血和非缺铁性贫血：IDA时骨髓细胞外铁显著减少或消失，铁粒幼红细胞明显减少，所见铁粒细小色浅，且以Ⅰ型为主，Ⅱ型极少见，Ⅲ型以上不见。经铁剂治疗后细胞外铁及内铁可迅速增多，此检查是诊断IDA及指导铁剂治疗的一种辅助方法；非IDA，如HA、MA、AA等病人的细胞外铁通常增高，内铁亦增高，以Ⅰ型、Ⅱ型为主，可以见到Ⅲ型，罕见Ⅳ型。因此，有助于鉴别IDA与非IDA。 2）用于诊断铁粒幼细胞性贫血：能找到数量不等的环形铁粒幼细胞，多见粗颗粒的Ⅲ型与Ⅳ型铁粒幼细胞。 3）用于诊断伴环形铁粒幼细胞增多的MDS：骨髓中环形铁粒幼细胞＞15%。 1.目的 掌握氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色的原理、方法、注意事项及临床意义。 2. 原理 氯乙酸AS-D萘酚被细胞内氯乙酸AS-D萘酚酯酶(naphythol AS-D chloroacetate esterase,NAS-DCE)水解，产生AS-D萘酚，再与重氮盐偶联，生成不溶性的红色沉淀，定位于胞质内酶的所在部位。 3. 方法步骤： 1）固定 新鲜干燥的涂片在固定液中固定30s～60s，或用甲醛蒸气薰蒸5~10min，水洗，待干。 2）放入作用液中，作用37℃30min，水洗。 3）苏木素或甲绿复染，水洗，待干，镜检。 4）结果判断　阳性反应为红宝石色颗粒，定位于胞质中。 4. 注意事项： 1）冬季室温低，萘酚和坚牢紫酱GBC盐不易溶解，可放37℃温箱促溶。 2）配制作用液时可先将萘酚在丙酮中溶解后再加其它液体。 3）氯乙酸萘酚酯酶最适宜反应pH值为7.0 ～ 7.6；此酶不被氟化钠抑制。 4）涂片染色后不能长期保存。 5）底物配制后可能出现混浊，但不影响染色效果。 6）重氮盐可选用新品红、坚固蓝等。 5. 临床意义： 氯乙酸AS-D萘酚酯酶主要分布在粒细胞系和肥大细胞内，因此又称粒细胞酯酶。氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色较过氧化物酶染色更具特异性。AML时，原始粒细胞呈阳性反应；AMOL时白血病细胞一般呈阴性反应；ALL时白血病细胞均呈阴性反应。 AML-M1： AML-M3: 粒细胞、Aure body 阳性 AML-M5: 中性成熟粒细胞呈强阳性为，其他原幼单核细胞均呈阴性 1.目的 α-丁酸萘酚酯酶染色的原理、方法、注意事项及临床意义。 2. 原理 细胞内的α-丁酸萘酚酯酶(alpha-naphthol butyrate esterase, α-NBE)在碱性条件下，将基质中的α-丁酸萘酚水解，产生α-萘酚，再与重氮盐偶联，生