医学课件肿瘤分子生物学.ppt

肿瘤分子生物学 制作人 谭宇蕙 背景知识回顾 一、遗传信息传递过程中DNA复制的高保真性： （一）遵循严格的碱基配对规律，A-T，G-C配对. DNA聚合酶在复制延长中严格选择配对碱基 （二）复制出错时DNA聚合酶有即时校读. DNA聚合酶有3’-5’外切酶活性 严格选择配对碱基 3’-5’外切酶活性 （三）突变与修复 （2） 基因突变（gene mutation） 1.点突变（point mutation） 转换（ transition） 颠换 （transversion） 2. 缺失（deletion）、插入 （insertion ）与框移突变/移码突变 （frame-shift mutation ） 3. 重排（ rearrangement） （3）DNA的损伤和修复（DNA damage and repairing ） 光复活 （photoreactivation）： 光修复 酶（photolyase） 切除修复 （excission repairing）: DNA-polⅠ, DNA ligase 重组修复 （recombination repairing） SOS修复 （SOS repairing）： 应急性修复，允许差错， 保留错误多，引起广泛、长期突变 （4）整体修复 细胞凋亡: 程序化死亡.生理性死亡 免疫系统 二、肿瘤的发生 细胞水平—— 细胞增殖、分化、凋亡发生异常，细胞总数失控，恶性生长造成。 增殖 分化、凋亡 生的过度，死亡失却 （一）肿瘤细胞的特征 1、肿瘤是一种基因异常的疾病，也是细胞疾病 肿瘤细胞表型能稳定遗传 病因：DNA异常、发生多基因突变。 DNA诱变剂都是致癌物 体外转染癌基因可引起正常细胞变异为癌细胞 （二）肿瘤细胞体外培养中的特征 1、原代细胞 脊椎动物的正常细胞 临界现象，生长数代后死亡 帖壁依赖性 生长因子依赖性 接触抑制 3、转化的细胞或 肿瘤细胞株 无临界点，永生化 无帖壁依赖性 无生长因子依赖性 无接触抑制 有致癌性 人胃癌细胞MGC7901 H22小鼠肝癌细胞 插入绿色荧光蛋白的小鼠黑色素瘤细胞 接种H22肝癌细胞的小鼠 癌基因oncogene :能使靶细胞发生恶性转化的基因 病毒癌基因v- onc: 病毒基因组中能诱发肿瘤的核酸片段.如v-Src 原癌基因（细胞癌基因）c-onc： 与癌基因同源、正常细胞内调控生长和分化的基因，变异后成为癌基因。 一、癌基因的发现 （一）病毒癌基因v-onc 1910年Rous发现鸡肉瘤病毒RSV的致癌作用 1975年从RSV中分离到src癌基因 致癌病毒分RNA病毒、DNA病毒 致癌病毒以RNA病毒即逆转录病毒为主 DNA肿瘤病毒 主要DNA肿瘤病毒类型: 多瘤病毒：使小鼠致瘤 人类乳头瘤病毒HPV：可引起子宫颈癌 腺病毒：致瘤性弱，改造后是基因治疗载体 逆转录病毒 1、逆转录 2、逆转录病毒转化类型 急性转化型 感染短期内致癌 癌基因在病毒基因组内，但不插在结构基因中 有体外使细胞转化能力 慢性转化型 感染后长时间才致癌 病毒基因组不含癌基因 无体外转化细胞的能力 （二）细胞癌基因（原癌基因） 发现 用 Ras基因突变体转染NIH3T3，使之成为转化细胞 原癌基因 能激活为癌基因的正常细胞基因 （三）病毒癌基因的来源与特点 来源： 细胞癌基因 例如RSV的Src癌基因，所有脊椎动物DNA都含有近似病毒癌基因的基因 特点 1.缺失内含子 2.转录由病毒的长末端重复序列LTR控制， LTR是强的增强子，可使转录高水平进行 3.多数已发生突变，例如病毒癌蛋白常缺失原癌蛋白的羧基而有转化活性 RNA肿瘤病毒诱导细胞转化的途径 逆转录病毒转导原癌基因的三种模型 直接包装 整合重排剪接 在反转录中突变 1、直接包装了癌基因成为急性转化型 2、整合时，插入突变激活了原癌基因，或使抑癌基因失活；或因病毒有强大的启动子\增强子， 从而大大提高整合位置附近的原癌基因表达水平；或包装了原癌基因，重排剪接激活原癌基因 3、在逆转录中原癌基因突变为癌基因,因为逆转录酶合成DNA的 差错率很高；或包装时使旁边的原癌基因或