第6章分子荧光及磷光.pptVIP

1. 分子荧光、磷光分析法的基本原理 2.荧光分析仪器 3. 分子荧光定量分析 4.荧光的影响因素，分子荧光的分析应用 通常具有不饱和基团的基态分子光照后，一个价电子跃迁，跃迁到激发态 （3）.激发光谱与发射光谱的关系 镜像规则的解释 2.荧光（磷光）分析仪器 仪器光路图 仪器框图 2.1.1.光源 激发光源一般要求比吸收测量中的光源有更大的发射强度；适用波长范围宽 荧光计中，常使用卤钨灯作光源 荧光光度计中常用高压汞灯和氙弧灯 荧光计用滤光片作单色器，荧光计只能用于定量分析，不能获得光谱。 大多数荧光光度计一般采用两个光栅单色器，有较高的分辨率，能扫描图谱，既可获得激发光谱，又可获得荧光光谱。 第一单色器作用：分离出所需要的激发光，选择最佳激发波长? ex ，用此激发光? ex激发液池内的荧光物质。（VB2 ? ex为471nm） 第二单色器作用：滤掉一些杂散光和杂质所发射的干扰光，用来选择测定用的荧光波长? em。 在选定的? em 下测定荧光强度，定量分析。 （VB2 ? em为525nm） 盛放测定溶液. 通常是石英材料的方形池，四面都透光，只能用手拿棱或最上边 2.2.激发光谱和荧光光谱获得 异常现象