抗体酶PPT课件.ppt

抗体酶（Abzyme) 科学家们设想：如抗体能专一地识别某化学反应的过渡态，它应能利用其结合能降低该反应的活化能，从而像酶一样催化该化学反应加速进行。抗体酶技术中研究得最广泛的是酯水解反应。人们用与某些酯类水解反应之过渡态结构相似的化合物作为半抗原来生产单克隆抗体。由于单克隆抗体的特点是专一性强，设想这种抗体的结合位点应当契合该水解反应的过渡态结构，使其稳定在过渡态，进而催化其水解。 结果按这种设想所得到的抗体不仅使酯的水解速度增加了103～104倍，而且还具备专一性、 pH依赖性及被抑制剂抑制等酶的基本特性。抗体酶的催化活性虽然仍比天然酶小，但这意味着可按人的意愿来设计和生产具有已知结合专一性的蛋白质，在理论上和实践上均有重要意义。美国已将抗体酶技术商品化，在第一批具有应用价值的抗体酶中有与蛋白酶相似的抗体，可在特定的氨基酸序列上切割蛋白质，从而建立具有各种专一性的切割蛋白质抗体酶库，就像限制性核酸内切酶库一样供研究者选用。 有一种抗体酶可切开血纤维蛋白（血凝块的主要成分），可能用于治疗心脏病时溶解血凝块。另一些抗体酶可固定在癌变细胞突出的蛋白质上，破坏癌细胞膜，因而将用于治疗癌症。还有些抗体酶可识别并破坏病毒中氨基酸连接所形成的特殊片段，从而防止病毒与靶细胞结合。有机合成化学家可望利用抗体酶技术提供新的催化剂，使那些现在还不能利用天然酶催化的复杂反应实现酶催化反应。 一、抗体酶的催化特征 抗体酶具有典型的酶反应特性；与配体(底物)结合的专一性，包括立体专一性，抗体酶催化反应的专一性可以达到甚至超过天然酶的专一性；具有高效催化性，一般抗体酶催化反应速度比非催化反应快104～108倍，有的反应速度已接近于天然酶促反应速度；抗体酶还具有与天然酶相近的米氏方程动力学及pH依赖性等。 若抗体能结合反应的过渡态，理论上它则能够获得催化性质 以过渡态类似物作为半抗原，则其诱发出的抗体即与该类似物有着互补的构象，这种抗体与底物结合后，即可诱导底物进入过渡态构象，从而引起催化作用。根据这个猜想列那和苏尔滋(P．C．Schultz)分别领导各自的研究小组独立地证明了：针对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体，能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。1986年美国Science杂志同时发表了他们的发现，并将这类具催化能力的免疫球蛋白称为抗体酶或催化抗体。 酰基转移反应 Claisen 重排 反应机理 ?? Claisen 重排是个协同反应，中间经过一个环状过渡态，所以芳环上取代基的电子效应对重排无影响。 Claisen重排是分子内的重排。 反应实例 Claisen 重排具有普遍性，在醚类化合物中，如果存在烯丙氧基与碳碳相连的结构，就有可能发生Claisen 重排。 氧化还原反应 金属螯合反应 磷酸酯水解反应 磷酸酯闭环反应 光诱导反应 b.光裂解反应 Diels-Alder反应是20世纪有机合成方面最主要的发现之一，也是有机化学中非常重要的一类反应。所谓Diels-Alder反应是指含有共轭二烯结构的双烯体和含不饱和键的亲双烯体，通过1，4-加成得到环状烯烃，故又称为双烯合成反应。Diels-Alder反应的本质是双烯体和亲双烯体发生［4+2］环加成，其历程是协同进行的周环反应。由于Diels-Alder反应在有机化合物的分离、鉴别以及合成中应用广泛，所以吸引了人们从反应机理、反应条件以及可发生的范围等多方面进行着不断深入地再研究 Diels-Alder反应机理 一些简单的Diels-Alder反应例子 抗体酶的研究，为人们提供了一条合理途径去设计适合于市场需要的蛋白质，即人为地设计制作酶。它是酶工程的一个全新领域。利用动物免疫系统产生抗体的高度专一性，可以得到一系列高度专一性的抗体酶，使抗体酶不断丰富。随之出现大量针对性强、药效高的药物。立体专一性抗体酶的研究，使生产高纯度立体专一性的药物成为现实。以某个生化反应的过渡态类似物来诱导免疫反应，产生特定抗体酶，以治疗某种酶先天性缺陷的遗传病。抗体酶可有选择地使病毒外壳蛋白的肽键裂解，从而防止病毒与靶细胞结合。抗体酶的固定化已获得成功，将大大地推进工业化进程。 用人工方法合成的抗体酶，可作为研究酶作用机理的有力工具，用于催化大量天然酶不能催化的立体专一性反应，更为开发具有高度选择性的药物指明了方向。 存在的问题 尽管抗体酶研究取得了很大进展，离开实际应用仍有一段距离。首先是催化效率问题： 目前所得的大部分催化抗体的反应速度只能是中等水平的， 比酶催化低 2—3 个数量级；因此，如何提高抗体酶的催化效率是个挑战。其次是筛选问题：目前的筛选方法只能筛选库中有用抗体的一小部分；一般是通过对半抗原结合力的大小来筛选的，而不是通过催化活性来筛选，可是对半抗