染色体图像分析仪操作原理应用及染色体分析的ISCN1995标准.ppt

染色体图像分析仪操作原理、应用及染色体分析的ISCN1995标准 染色体的定义 染色体是DNA链高度浓缩的一种状态； DNA链这种暂时的“短粗”状态使显微镜下观察染色体成为可能； 染色体只在细胞分裂中期短暂存在； 细胞分裂结束，DNA链重新拉伸，以染色质的状态存在； 染色体相关技术 用秋水仙素等物质处理，可以将细胞分裂阻断在中期，从而获得大量的细胞中期分裂相供染色体分析； 细胞低渗技术使细胞中的染色体在玻片上铺散得更好，易于计数和观察； 染色体显带技术，使人类能够分辨和观察更为精细的染色体结构。 显微切割、荧光原位杂交（FISH）、比较基因组杂交（CGH）等技术将染色体上的片断与特异的DNA片断联系 起来。 染色体分析的基本方法 普通光学显微镜分析： 手动寻找细胞分裂相； 100×油镜下肉眼检查染色体； 纸上手工画图作核型分析。 繁琐、费时、需要极大的耐心。 普通光学显微镜染色体分析 2 手动式的染色体图像分析仪： 由一台普通显微镜或荧光显微镜连接一台照相设备和安装有“自动化染色体分析系统”的计算机组成； 手动寻找细胞分裂相； 100×油镜下肉眼计数； 分裂相通过显微照相输入电脑； “自动化染色体分析系统”辅助完成核型分析  手动式的染色体图像分析仪优点 利用计算机软件提高了染色体分析的准确性； 细胞分裂相照片和染色体核型分析的资料图片可长期存于电脑，便于管理调阅； 3 全自动染色体图像分析系统： 显微镜自动寻找细胞分裂相并记录下坐标、焦距；人工筛选出感兴趣的分裂相形成一个列表； 在100×油镜下按列表逐个检查分裂相（肉眼计数、分析）； 看到标本质量好或有特殊异常的分裂相，按下“照相”按钮，可以立即转为计算机辅助核型分析，方便快捷，增加分析的准确性。 全自动染色体图像分析系统优点： 显微镜自动扫片寻找分裂相； 对分裂相稀少的标本尤其适用； 提高检查效率； 提高检查准确性; 方便的资料存储和调阅。 全自动染色体图像分析系统 染色体分析的ISCN1995标准 1 人类细胞遗传学简史 1956年 Tjio和Levan首次证实了人类染色体数目为46条； 1971年，第一张显带的人类染色体核型发表； 1977年，在整理前十多年的遗传学会议的结义，制定了“人类细胞遗传学国际命名体制”（ISCN）的第一版，包括了人类细胞遗传学命名的完整体系； ISCN(1981)：增加了高分辨染色体的内容而成； ISCN(1985)：做了一些修订而成； ISCN(1995)：增加了原位杂交技术和肿瘤细胞遗传学的内容而形成。  非显带技术时期 染色体按长度由长到短依次命名为1到22号，性染色体为X和Y；根据染色体长度和着丝粒的位置，分为七组： A组：1-3 B组：4、5 C组：6-12、X D组：13-15 E组：16-18 F组：19、20 G组：21、22、Y 显带技术 应用一种或多种显带技术处理之后，染色体的某个区域与其相邻片断比较起来，被染料染得特别深或者特别浅，这个染料颜色与周围片断明显不同的区域，称为带。 最先发表的显带方法是使用芥子奎吖因和二盐酸奎吖因产生的荧光带型，即Q显带方法，显出Q带； 使用吉姆萨染料染出的几乎一致的带纹，即G显带方法，显出G带； 有些显带技术产生的深浅与G带相反，即反式显带方法，显出R-带 唐氏综合征患者染色体核型(GTG) 不同显带技术目的不同 G带、Q带、R带 可以产生沿整条染色体分布的带纹； 有些显带方法不能产生足以识别每一条染色体的带纹，而是为了显示染色体的一些特殊结构： C显带的目的是为了观察染色体的结构异染色质区； T 显带的目的是为了观察染色体的端粒带型； NOR显带的目的是为了观察染色体的核仁组织区； 核型命名的一些基本规则 描述染色体结构畸变，有简式体系和繁式体系。 简式体系 记载好畸变类型和所包括的染色体之后，将断裂点写在括号中列出，断裂点用染色体带来描述，由短臂到长臂顺序列出，不予分开。 两点断裂重排当一条染色体的两臂都发生断裂，产生两处断裂的重排时，首先列出的断裂点，再列出的断裂点： 46，XX，inv(2)(p2lq3 1) 当两处断裂发生于同一臂时，则首先列出离着丝粒较近的断裂点： 46，XX，inv(2)(p13p23)  当断裂发生于两条染色体，则首先列出编号较小的染色体，但如果重排染色体中有一条是性染色体，则该染色体首先列出： 46，XY，t(12；16)(q13；pl 1) 46，X，t(X；18)