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可注射聚丙交酯多孔微载体制备及骨髓基质干细胞培养研究答辩人：王暾 指导老师：全大萍副教授 目录 选题意义 研究内容 实验内容 结果与讨论 创新之处 Ⅰ 选题意义 制备新型用于细胞培养和传输的可注射可降解组织工程用细胞微载体 克服传统微球和微包囊的缺陷，制备表面多孔，内部具有多孔结构，更有利于细胞黏附生长的细胞微载体 组织工程支架 传统细胞微载体特点 实心微球载体：细胞只能在微载体表面生长，表面积有限； 微包囊载体：细胞被包裹在微囊内部，不利于营养物质传输，不利于细胞黏附和生长； Ⅱ 主要研究内容 研究了聚丙交酯（PDLLA)多孔微载体的粒径控制 研究了PDLLA多孔微载体的孔径和孔隙率的控制 通过骨髓基质干细胞在微载体表面的培养评价细胞在微载体上的黏附和生长 Ⅲ 实验内容 1. 微球采用双乳化-溶剂挥发技术制备 不同浓度碳酸氢铵水溶液 聚丙交酯－二氯甲烷溶液 1%PVA溶液 0.1%PVA溶液 （溶剂挥发） 初乳液经超声乳化分散是保障制备具有均匀尺寸分布的微球关键由于内水相未含PVA乳化剂，而碳酸氢铵遇水易分解，产生的微气泡可以起到一定的乳化作用，使得W内/O体系稳定。初乳液经超声分散后迅速倾入大量的外水相中，形成W内/O/W外体系，随着有机溶剂的挥发，微球迅速固化，同时内水相中的碳酸氢铵继续分解溢出，则形成从微球内部到表面的微孔通道 Ⅳ 结果与讨论 影响PDLLA多孔微载体粒径的因素分析 细胞微载体粒径在300μm左右时适合以注射方式给入，且有利于细胞生长 1. 聚合物分子量的影响 低分子量(34K)的PDLLA所制备的微球粒径明显低于高分子量(161K)PDLLA所制备的微球粒径 2. 分散速率的影响 影响PDLLA多孔微载体内部孔径和孔隙率的因素 Fig.2 Water uptake ratio 结论： 采用了W/O/W双乳化-溶剂挥发技术通过控制制备条件可得到粒径适合注射的多孔微载体 通过控制内水相中碳酸氢铵的浓度可控制多孔微载体的孔径和孔隙率 BMSCs细胞在微载体上的黏附和生长显示微载体是具有良好发展前景的组织工程支架材料 Ⅴ 创新点 制备粒径大小可通过注射的方式进入机体受损部位 的多孔细胞微载体，无需移植手术，在治疗不规则缺损方面有重要意义 制备的微载体具有表面开孔，内部相互连通的孔结构，与传统的实心微球相比，提高了细胞的负载率，与微包囊相比，更有利于细胞的生长和繁殖 致谢 感谢我的导师全大萍副教授的精心指导和亲切关怀！ 感谢廖凯荣教授和帅心涛教授对我的指点和关心！ 中山大学化学与化学工程学院创新化学实验与研究基金项目对本课题的支持！ * * 组织工程支架 体外预制成型 通过注射成型 水凝胶类材料 细胞微载体 水凝胶类材料的缺点:生物相容性、生物降解吸收性不能完全满足组织工程对支架材料的要求 （超声乳化） 气泡 内水相液滴 微球 外水相 2. 制备原理 Disperse speed (rpm) 1000 900 800 700 600 500 Mean particle size (μm) 106.3±7.7 195.6±41.4 162.2±8.3 201.0±18.3 292.5±17.7 367.9±14.3 Polydispersity 0.40±0.05 0.28±0.16 0.22±0.02 0.35±0.04 0.24±0.02 0.35±0.02 Table1 The effects of whisk speed on the size of microspheres samples 1 2 3 4 5 The concentration of NH4HCO3 solution (%) 0 1 5 10 15 Mean particle size(μm) 335.4±6.2 281.6±32.1 292.5±17.7 341.6±29.6 425.5±39.8 Polydispersity 0.37±0.03 0.58±0.09 0.24±0.02 0.40±0.04 0.39±0.04 water uptake ratio(%) 75.2 76.0 76.2 82.6 86.9 Table 2 The e